BioAssay Systems 二胺氧化酶测定试剂盒-可轻松自动化为高通量96孔板检测

二胺氧化酶（DAO），也被称为组胺酶或含铜的胺氧化酶，是一种参与动物体内组胺代谢、氧化和失活的酶。其最高水平出现在消化道和胎盘中。组胺摄入量与组胺降解能力之间的不平衡可能导致组胺不耐受（HIT）。检测血清中的DAO活性对于诊断HIT是有用的。

BioAssay Systems的非放射性、荧光法DAO检测试剂盒基于腐胺氧化生成吡咯啉以及NH3和H2O2的过程。生成的H2O2随后被辣根过氧化物酶（HRP）用于氧化一种染料，使其产生荧光。在λex/em = 530/585 nm处的荧光增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品二胺氧化酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 快速且灵敏。使用10 L样本。在25?C下反应30分钟时，线性检测范围为0.5到6 U/L。

- 方便。操作过程仅涉及加入单一工作试剂，并在0分钟和30分钟时读取荧光。室温检测，无需37°C加热设备。

- 高通量。可轻松自动化为高通量96孔板检测，每天可处理数千个样本。

应用领域

- 直接检测：血清或血浆样本中的DAO活性。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）

- 检测缓冲液：10 mL

- HRP酶：120 L

- 底物：120 L

- H2O2标准品：100 L

- 染料试剂：120 L

储存条件

- 试剂盒在常温下运输。收到后将所有组分储存于-20°C。有效期：收到后6个月。

- 注意事项：试剂仅供研究使用。打开前需短暂离心管子。检测前将所有组分恢复至室温。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。

操作步骤（使用96孔板）

1. 内标制备。首先，将5 L H2O2标准品（882 mM）与495 L去离子水混合，制备500 L 8.82 mM H2O2溶液。然后，将20 L 8.82 mM H2O2与960 L去离子水混合，制备180 M内标溶液。稀释后的H2O2需在1小时内使用。

2. 工作试剂（WR）制备。为所有样本孔制备足够的工作试剂，每孔混合：85 L检测缓冲液、1 L HRP酶、1 L底物和1 L染料试剂。为所有样本空白和内标孔制备足够的空白工作试剂（BWR），每孔混合：85 L检测缓冲液、1 L HRP酶和1 L染料试剂（即不加底物）。

3. 样本加样。将每个样本的10 L分别加入黑色平底96孔板的三个独立孔中：一个用于样本测量（FS），一个用于样本空白（FSB），一个用于内标（FIS）。向样本和样本空白孔中加入10 L去离子水。向内标孔中加入10 L 180 M H2O2。

4. 试剂加样。向每个样本孔中加入80 L WR。向每个样本空白和内标孔中加入80 L BWR。

5. 荧光读取。在时间0和30分钟时，读取λex/em = 530/585 nm处的荧光。

所需材料（但未提供）

- 移液装置、离心管、黑色平底96孔板（例如Greiner货号655209）和酶标仪。

示例：

人血清中DAO的滴定

文献参考：

1. Music, E., et al (2013). Serum diamine oxidase activity as a diagnostic test for histamine intolerance. Wien Klin Wochenschr 125:239-243.

2. Mondovi B, et al (2013). Effects of amine oxidases in allergic and histamine-mediated conditions. Recent Pat Inflamm Allergy Drug Discov. 7(1):20-34.

3. Maintz L, Novak N. (2007). Histamine and histamine intolerance. Am J Clin Nutr. 85(5):1185-96. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。