BioAssay Systems DNA测定试剂盒- 简单、高通量且干扰低

DNA定量是分子生物学中常见的操作。很多时候，DNA的量非常少，而传统的260 nm紫外吸收法需要微克级别的量才能获得可靠的结果。在测序、克隆、转染和DNA标记等实验中，准确测定低浓度DNA的浓度对于获得可重复的结果至关重要。

用于测定DNA浓度的简单、直接且易于自动化的操作流程是非常理想的。BioAssay Systems的QuantiFluo? DNA检测试剂盒旨在准确测量质粒DNA、cDNA、聚合酶链式反应后的DNA以及从凝胶中洗脱的DNA的纳克级别含量。该改进方法利用了能够特异性结合双链DNA的Hoechst染料。在450 nm（激发波长为350 nm）处测量的荧光强度与样本中的DNA浓度成正比。优化的配方显著减少了原始样本中物质的干扰。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品DNA测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 灵敏且准确。在96孔板检测中，小牛胸腺DNA的线性检测范围为2 ng至40 ng（100 - 2,000 ng/mL）。

- 简单且高通量。“混合-读取”操作流程仅需加入一种工作试剂并读取荧光强度。可以轻松自动化为高通量检测，每天可处理数千个样本。

- 干扰低。RNA、盐（高达3M NaCl）、洗涤剂（< 0.01% SDS）以及常见的DNA提取缓冲液不会对检测产生干扰。

应用领域

- 直接检测：质粒DNA、基因组DNA、cDNA、聚合酶链式反应后的DNA以及从凝胶和其他基质中提取的DNA。

试剂盒组成（96孔板，250次检测）

- 试剂：50 mL

- 标准品：1 mL（10 ug/mL小牛胸腺DNA）

储存条件

- 试剂盒在室温下运输。收到后，将DNA标准品储存于-20°C，试剂储存于2-8°C。有效期：收到后12个月。

- 注意事项：试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。

操作步骤

- 准备：使用前将试剂恢复至室温。

- 使用96孔板的操作步骤：

1. 将80 uL标准品与320 uL TE缓冲液（10 mM Tris，1 mM EDTA，pH 7.4）混合，制备400 uL 2000 ng/mL的预混液。按照以下方法稀释标准品。将20 uL稀释后的标准品和样本加入黑色平底96孔板的孔中。将标准品储存于4°C以供后续使用。

2. 加入200 uL工作试剂，并轻轻敲击以混合。

3. 在室温下孵育1分钟，并在440 - 460 nm（峰值450 nm，激发波长为340 - 370 nm）处读取荧光发射强度。

- 使用比色皿的操作步骤：

1. 将100 uL稀释后的标准品和样本转移到比色皿中。

2. 加入1000 uL工作试剂，并轻轻敲击以混合。

3. 在室温下孵育1分钟，并在440 - 460 nm（峰值450 nm，激发波长为340 - 360 nm）处读取荧光强度。

一般注意事项

1. 对于未知DNA浓度的样本，取1 uL样本与99 uL TE缓冲液混合。进一步进行10倍系列稀释。对所有稀释后的样本进行检测，并选择荧光强度值落在线性校准范围内的稀释度来计算样本DNA浓度。

2. 小牛胸腺DNA作为植物和动物DNA的标准品，因为这两种生物的DNA中AT含量是保守的。对于细菌DNA，应使用与样本DNA含量最匹配的不同标准品。

3. 该染料与相同单链DNA结合时，荧光强度减半。短的单链DNA片段不会与该染料产生荧光。

示例：

96孔板测定中的标准曲线

文献参考：

1. Labuzek K, et al (2010). Metformin has adenosinemonophosphate activated protein kinase (AMPK)-independent effects on LPS-stimulated rat primary microglial cultures. Pharmacol Rep. 62(5):827-48.

2. Mayer-Wagner S et al. (2010). Membrane-based cultures generate scaffold-free neocartilage in vitro: influence of growth factors. Tissue Eng Part A. 16(2):513-21.

3. Bhavnani B.R. et al. (2008). Structure activity relationships and differential interactions and functional activity of various equine estrogens mediated via estrogen receptors (ERs) ERalpha and ERbeta. Endocrinology. 149(10):4857-70. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。