碱性磷酸酶(ALP)在碱性环境中催化磷酸酯的水解,生成有机自由基和无机磷酸盐。在哺乳动物中,这种酶主要存在于肝脏和骨骼中。血清中ALP水平显著升高是一种被称为高碱性磷酸酶血症的疾病,它与恶性胆道阻塞、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、肝淋巴瘤和结节病有关。
用于测定血清中ALP活性的简单、直接且易于自动化的程序在研究和药物发现领域越来越受欢迎。这种改进的方法利用了4-甲基伞形酮磷酸盐,它被ALP水解成具有高度荧光的产物4-甲基伞形酮。荧光增加的速率与酶活性成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品碱性磷酸酶测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
碱性磷酸酶测定试剂盒 | BAS-QFAP-100 | 查看 |
主要特点
- 高灵敏度和宽线性范围。使用10微升样本。检测限为0.02 U/L(20分钟反应)。
- 均质且简单的操作流程。简单的“混合-测量”操作流程可在20分钟内可靠地定量ALP活性。
- 稳定且适用于高通量筛选。所有试剂均与高通量液体处理仪器兼容。
应用领域
- 直接测定:血清、血浆及其他来源中的ALP活性。
- ALP生产过程中的特性分析与质量控制。
- 药物发现:用于ALP调节剂的高通量筛选。
试剂盒组成(96孔板,100次检测)
- 试剂:14毫升(pH 10.5)
- 标准品:120微升
储存条件
- 试剂盒在室温下运输。收到后应于-20°C保存。有效期为2年。
- 注意事项:试剂仅用于研究。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。
操作步骤
- 使用前将试剂解冻至室温。本测定基于动力学反应。建议使用多通道移液器。向样本中添加试剂应迅速,混合应简短但充分。测定可在室温或37°C下进行。
- 样本准备:ALP在4°C下可稳定48小时,在-20°C下可稳定2个月。EDTA、草酸盐、氟化物、柠檬酸盐是已知的ALP抑制剂,在样本准备过程中应避免使用。血清、血浆(不含EDTA/柠檬酸盐,最好无溶血)和细胞培养基可直接用于检测。
所需材料(但未提供)
- 移液装置及配件(例如多通道移液器)。
- 黑色平底96孔板(例如Corning Costar)和酶标仪。
一般注意事项
1. 对于低ALP活性样本(<1 U/L),建议延长孵育时间,例如延长至60分钟。
2. 可根据需要将反应体积缩小用于384孔测定,或放大用于比色皿测定。
示例:
标准曲线(孵育20分钟)
文献参考:
1. Domazetovic, V., et al (2020). Blueberry juice antioxidants protect osteogenic activity against oxidative stress and improve long-term activation of the mineralization process in human osteoblast-like saos2 cells: Involvement of sirt1. Antioxidants (Basel, Switzerland), 9(2).
2. Laura, BP et al. (2015). Lasting effects of butyrate and low FM/FO diets on growth performance, blood haematology/biochemistry and molecular growth-related markers in gilthead sea bream (Sparus
aurata). Aquaculture. 454 (2016) 8-18.
3. Ballester-Lozano GF et al. (2015). Comprehensive biometric,biochemical and histopathological assessment of nutrient deficiencies in gilthead sea bream fed semi-purified diets. Br J Nutr. 114(5):713-26.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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