ADP/ATP比率的变化已被用于区分细胞死亡和存活的模式。ATP水平的增加和ADP水平的降低标志着细胞处于增殖状态。相反,ATP水平的降低和ADP水平的增加则代表细胞处于凋亡或坏死状态,其中在坏死中ATP的降低和ADP的增加比凋亡更为显著。
BioAssay Systems 的 EnzyLight? ADP/ATP比率检测试剂盒提供了一种快速的方法,用于测量ADP和ATP水平,以筛选哺乳动物细胞中的凋亡、坏死和细胞增殖。该检测分为两个步骤。在第一步中,工作试剂裂解细胞以释放ATP和ADP。在荧光素酶存在的情况下,ATP立即与底物D-荧光素反应产生光。光的强度是细胞内ATP浓度的直接指标。
在第二步中,通过酶促反应将ADP转化为ATP。这种新形成的ATP随后与D-荧光素反应,如同第一步中一样。
这种非放射性、均质的基于细胞的检测是在微孔板中进行的。该试剂与所有培养基兼容,并且适用于96孔和384孔板的高通量筛选应用中的所有液体处理系统。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyLight ADP/ATP比值测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
EnzyLight ADP/ATP比值测定试剂盒 | BAS-ELDT-100 | 查看 |
主要特点
安全:非放射性检测。
均质且便捷:“混合 孵育 测量”型检测。无需洗涤和试剂转移步骤。
稳定且适合高通量筛选(HTS):在96孔和384孔板中,通常可观察到大于0.5的Z'因子。可在高通量筛选液体处理系统上轻松自动化操作,每天可处理数千个样本。
应用
细胞凋亡和坏死的检测。
细胞增殖:细胞因子、生长因子、营养物质的影响。
药物发现:抗肿瘤药物的高通量筛选。
结果解读
不同比率的解读可能会因细胞类型和使用条件而显著不同。然而,以下可以作为指导:
1. 测试显示与对照细胞相比,ATP水平显著升高,而ADP水平没有显著增加 = 增殖。
2. 测试显示与对照细胞相比,ATP水平降低,ADP水平增加 = 凋亡。
3. 测试显示与对照细胞相比,ATP水平显著降低,ADP水平大幅增加 = 坏死。
文献参考:
1. Rajamani, U., Gross, A. R., Ocampo, C., Andres, A. M., Gottlieb, R.A., & Sareen, D. (2017). Endocrine disruptors induce perturbations in endoplasmic reticulum and mitochondria of human pluripotent stem cell derivatives. Nature communications, 8(1), 219.
2. Villa-Bellosta, R., Hamczyk, M. R., & Andres, V. (2017). Novel phosphate-activated macrophages prevent ectopic calcification by increasing extracellular ATP and pyrophosphate. PloS one, 12(3),e0174998
3. Taneike, M., Nishida, K., Omiya, S., Zarrinpashneh, E., Misaka, T.,Kitazume-Taneike, R. & Shah, A. M. (2016). mTOR hyperactivation by ablation of tuberous sclerosis complex 2 in the mouse heart induces cardiac dysfunction with the increased number of small mitochondria mediated through the down-regulation of autophagy.PLoS One, 11(3), e0152628.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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