蛋白质磷酸化在调节细胞内蛋白质活性方面发挥着关键作用。许多蛋白激酶和磷酸酶已知参与多种信号传导通路。在生命科学研究和药物发现中,能够监测此类信号传导通路、靶蛋白磷酸化状态以及药物效应的快速检测方法是极为理想的。
肝激酶B1(LKB1,STK11,PJS,hLKB1)是丝氨酸/苏氨酸激酶家族的成员,它调节细胞极性并作为肿瘤抑制因子发挥作用。BioAssay Systems 的 LKB1(S431)磷酸化ELISA试剂盒提供了一种快速且灵敏的方法,用于测量培养细胞中磷酸化蛋白pLKB1(S431)的水平,并将磷酸化水平与同一孔中的总蛋白含量进行标准化。这种简单高效的检测方法省去了细胞裂解液的制备步骤,可用于研究潜在的信号通路以及抑制剂、siRNA或激活剂对通路的影响。在此检测中,生长在96孔板中的细胞被固定和通透化。通过使用特异性一抗检测LKB1(S431)的磷酸化,随后使用辣根过氧化物酶(HRP)偶联的二抗和荧光底物,以及用于测量同一孔中总蛋白的荧光试剂。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyFluo 人/小鼠LKB1(S431)磷酸化ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
EnzyFluo 人/小鼠LKB1(S431)磷酸化ELISA试剂盒 | BAS-ELKB1-100 | 查看 |
主要特点
改进型:总检测时间从标准的21小时缩短至6.5小时(实际操作时间2.5小时)。
简单便捷:细胞直接在96孔板中培养,无需细胞裂解。
准确且高通量:将蛋白质磷酸化水平与同一孔中的总细胞蛋白进行标准化,极大地减少了孔间差异。可作为高通量96孔板检测自动化操作,每天可处理数千个样本。
应用
全细胞中LKB1(S431)磷酸化状态的测定。
通过激活剂、抑制剂、siRNA等评估通路调节效果。
已测试物种:人、小鼠、大鼠。
试剂盒组成
储备洗涤缓冲液:25 mL
封闭缓冲液:25 mL
蛋白染色液:6 mL
染料试剂:120 uL
Ab1:10 uL
Ab2(gM-HRP):10 uL
储存条件
本试剂盒在运输过程中使用冰袋包装。收到后,请将所有试剂存放在-20℃。这些试剂的有效期约为收到后6个月。
注意事项
试剂仅供研究使用。使用这些试剂时需遵循实验室试剂的常规安全措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
NIH 3T3细胞中LKB1(S431)磷酸化的诱导
将3×10?个NIH 3T3细胞在100 ?L培养基中接种到96孔板中。经过37℃过夜孵育后,细胞用50 ng/mL的PDGFbb在无血清培养基中处理。使用ELKB1-100试剂盒检测LKB1(S431)的磷酸化。
结果示例:
文献参考:
1. Cohen, P. (2002). The origins of protein phosphorylation. Nature Cell Biology. 4 (5): E127–130.
2. Smoly, I. et al (2017). An asymmetrically balanced organization of kinases versus phosphatases across Eukaryotes determines their distinct impacts". PLOS Computational Biology. 13 (1): e1005221.
3. Vlastaridis, P. et al (2017). Estimating the total number of phosphoproteins and phosphorylation sites in eukaryotic proteomes.GigaScience. 6 (2): 1–11
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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