纤溶酶(3.4.21.7)是一种丝氨酸蛋白酶,在纤溶过程中起着关键作用。纤溶酶以无活性形式——纤溶酶原的形式释放到循环中,纤溶酶原可以通过尿激酶等酶激活。纤溶酶/纤溶酶原系统在炎症、细胞外基质降解和伤口愈合中的作用已被广泛研究。BioAssay Systems 的 DPLM-100 试剂盒提供了一种便捷的比色法来测量纤溶酶活性。在此检测中,纤溶酶水解一种合成底物以释放对硝基苯胺(pNA),其在 405 nm 处有吸收。在 405 nm 处吸光度的增加与酶活性成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品纤溶酶测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
纤溶酶测定试剂盒 | BAS-DPLM-100 | 查看 |
主要特点:
- 安全且灵敏:非放射性检测。可使用低至 10 uL 的样本。96 孔板的线性检测范围为 0.35 至 56.5 U/L 活性。
- 快速便捷:操作过程仅涉及加入单一工作试剂并孵育 30 分钟。
- 高通量:均相“混合-孵育-测量”型检测。可轻松自动化,每天检测数千个样本。
应用:
- 用于定量测定生物样本中的纤溶酶活性。
试剂盒内容(96 孔板 100 次检测):
- 检测缓冲液:10 mL
- 底物:200 uL
- pNA 标准品:50 uL(100 mM 标准品)
储存条件:试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分储存于 -20°C。保质期:收到后 6 个月。
注意事项:试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
操作步骤:
- 该检测可在室温或 37°C 下进行。在检测前,将检测缓冲液平衡至所需温度。使用前短暂离心试管。该检测基于动力学反应。为确保相同的孵育时间,向样本中添加工作试剂的操作应迅速,混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。
- 样本准备:
- 注意:该检测不测量纤溶酶原。要使用此检测测量纤溶酶原,样本必须先与纤溶酶原激活剂(如尿激酶或链激酶)孵育。试剂盒中未提供激活剂。
- 血清可以直接用于检测。
- 标准品准备:通过将 6 uL 100 mM pNA 标准品与 194 uL 检测缓冲液混合,制备 3000 uM 标准品预混液。根据下表准备所有标准品。
- 反应准备:
1. 将每个样本的 10 uL 转移至不同的孔中。
2. 通过混合,为每个样本孔制备足够量的工作试剂(WR),每个孔加入 2 uL 底物和 95 uL 检测缓冲液。建议现配现用工作试剂。将 WR 保持在 37°C,直到加入样本孔中。
3. 向每个标准品孔(标准品 #1–4)中加入 90 uL 检测缓冲液。向每个样本孔中加入 90 uL WR。轻轻敲击平板以混合。
4. 立即在酶标仪上读取 405 nm 处的吸光度(OD?)。在 37°C 下避光孵育 30 分钟,然后再次读取 405 nm 处的吸光度(OD??)。或者,在第 3 步之后,在 37°C 下记录 405 nm 处的动力学曲线,至少持续 30 分钟。
- 所需材料(但未提供):
- 移液装置及配件(例如多通道移液器)、透明平底 96 孔板(例如 VWR 编号 82050-760)、离心管和酶标仪。
实例:
- 左侧:纤溶酶样本在 37°C 下的 96 孔板中进行检测。
- 右侧:人血清样本中的纤溶酶原在 37°C 下孵育 30 分钟后,通过链激酶激活。
文献:
1. Baker, S. K., & Strickland, S. (2020). A critical role for plasminogen in inflammation. The Journal of experimental medicine, 217(4), e20191865.
2. Politis, I., Zavizion, B., Barbano, D. M., & Gorewit, R. C. (1993).Enzymatic Assay for the Combined Determination of Plasmin Plus Plasminogen in Milk: Revisited. Journal of Dairy Science, 76(5), 1260–1267.
3. Korycha-Dahl, M., Dumas, B., Chêne, N., & Martal, J. (1983). Plasmin activity in milk. Journal of Dairy Science, 66(4), 704–711.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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