BioAssay Systems 脂肪酶测定试剂盒- 直接测定血清、血浆、唾液、尿液和其他生物样本中的脂肪酶活性

脂肪酶催化脂类底物甘油骨架上的酯键水解。在人体中，胰脂肪酶是负责在消化系统中分解脂肪的关键酶，通过将三酰甘油转化为单酰甘油和游离脂肪酸。人胰脂肪酶及其相关蛋白2是胰腺分泌的主要脂肪酶。在急性胰腺炎中，脂肪酶水平可能在24到48小时内升高5到10倍。脂肪酶活性的增加还与胰管阻塞、胰腺癌、肾脏疾病、唾液腺炎症、肠梗阻和其他胰腺疾病有关。脂肪酶水平的降低可能表明胰腺中产生脂肪酶的细胞发生了永久性损伤。

简单、直接且易于自动化的测定脂肪酶活性的方法非常受欢迎。BioAssay Systems的QuantiChrom?脂肪酶测定试剂盒基于改进的二巯基丙醇三丁酸酯（BALB）方法。在此方法中，脂肪酶水解BALB后形成的巯基（SH）与5,5'-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）反应，生成黄色产物。在412nm处测量的颜色强度与样本中的酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品脂肪酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

应用领域：

- 直接测定血清、血浆、唾液、尿液和其他生物样本中的脂肪酶活性。

主要特点：

- 灵敏且准确。96孔板测定的线性检测范围为40至1600 U/L脂肪酶活性。

- 便捷且高通量。操作过程仅涉及加入单一工作试剂，并在室温或37°C下于10分钟和20分钟读取吸光度。可自动化处理数千个样本/天。

试剂盒组成（96孔板100次测试）：

- 测定缓冲液（pH 8.5）：15 mL

- 显色试剂：530 mg

- BALB试剂：1.0 mL

- 校准液：2.0 mL（相当于735 U/L）

储存条件：本产品在室温下运输。将所有组分储存于4°C。保质期：收货后12个月。

注意事项：试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

操作步骤：

样本准备：脂肪酶抑制剂（EDTA和某些去污剂如Tween-20、NP-40）、巯基乙醇和二硫苏糖醇会干扰此测定，应在样本准备中避免使用。如果样本不能立即测定，可以冷冻保存至少一个月。组织和细胞裂解液可以通过在冷PBS缓冲液中匀浆并离心（例如14,000 rpm离心5分钟）获得。

工作试剂准备：将显色试剂混入测定缓冲液中，摇动小瓶以混合。加入0.8 mL BALB试剂（足够进行100次测定）。或者对于部分复溶：对于每个反应孔，混合5 mg显色试剂、140 uL测定缓冲液和8 uL BALB试剂。工作试剂应现配现用，并在1小时内使用完毕。

重要提示：此测定基于动力学反应，加入工作试剂应迅速。建议使用多通道移液器。

1. 将150 uL H?O和150 uL校准液分别加入到96孔透明底板的孔中。将10 uL样本分别加入到单独的孔中。向每个样本孔中加入140 uL工作试剂。轻轻敲击板以混合反应混合物。注意：如果要在其他温度（例如37°C）下进行测定，请在加入样本之前将工作试剂预热至该温度。

2. 在10分钟（OD10min）和20分钟（OD20min）时用酶标仪读取412nm处的吸光度。

3. 计算：脂肪酶活性按以下公式计算，

- 其中OD20min和OD10min分别是样本在20分钟和10分钟时的412nm吸光度值。ODCalibrator和ODH2O分别是校准液和水在20分钟时的412nm吸光度值。“735”是校准液在测定条件下的等效活性（U/L）。

- 注意：如果计算出的活性高于1600 U/L，请用蒸馏水稀释样本并重复测定。将结果乘以稀释倍数（n）。

- 单位定义：在测定条件（pH 8.5）下，每分钟催化1 umol底物水解的酶量为1个单位。

实例：

使用96孔板协议对样本进行双份测定。脂肪酶活性如下：小鼠血清为809 ± 15 U/L，大鼠血浆为959 ± 23 U/L，大鼠血清为665 ± 14 U/L，山羊血清为44 ± 1 U/L，牛血清为80 ± 1 U/L，人血清为75 ± 6 U/L，人血浆样本为52 ± 2 U/L

文献：

1. Imanikia, S. et al. (2019). Xbp-1 remodels lipid metabolism to extend longevity. Cell Reports, 28(3), 581-589.e4.

2. Shen, A. et al. (2017). NAD+ augmentation ameliorates acute pancreatitis through regulation of inflammasome signalling.Scientific reports, 7(1), 3006.

3. Gabbi, C., et al. (2008). Pancreatic exocrine insufficiency in LXRbeta-/- mice is associated with a reduction in aquaporin-1 expression. Proc Natl Acad Sci U S A 105(39):15052-7. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。