BioAssay Systems 谷胱甘肽s-转移酶试剂盒：助力细胞解毒研究

谷胱甘肽转移酶（GST）是一种多功能酶，在细胞解毒过程中发挥重要作用。GST通过催化谷胱甘肽（GSH）与外源化合物（如致癌物和药物）的亲电和/或疏水位点结合，保护细胞免受这些有害物质的损害。

BioAssay Systems的谷胱甘肽S-转移酶试剂盒基于GSH与GST底物CDNB（1-氯-2,4-二硝基苯）之间的酶促反应。GST催化形成的GS-DNB产生了一个二硝基苯硫醚，该产物可以在340 nm处通过光谱光度法检测。340 nm处吸光度的增加速率与样本中的GST活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品谷胱甘肽s-转移酶试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 快速灵敏。线性检测范围（20 uL样本）：在25°C下10分钟反应，检测范围为2至80 U/L。

- 方便高效。均质“混合-孵育-测量”型检测。可在高通量筛选液体处理系统上自动化操作，每天可处理数千个样本。

应用

用于测定生物样本（如细胞裂解液、组织等）中的谷胱甘肽S-转移酶活性。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）

- 检测缓冲液：25 mL

- 谷胱甘肽：粉末

- CDNB：120 uL

储存条件

试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分储存于4°C。有效期：收到后6个月。

注意事项

- 试剂仅供研究使用。使用试剂时需遵循实验室试剂的常规注意事项。详细信息请参阅材料安全数据表。

操作步骤

本检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，加入工作试剂时需迅速，混合需短暂但充分。建议使用多通道移液器。检测可在任何所需温度下进行（例如25°C或37°C）。

样本准备

- 组织：解剖前，用磷酸盐缓冲液（pH 7.4）冲洗组织以去除血液。将50 mg组织在含有2 mM EDTA的冷100 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.0）中用Dounce匀浆器匀浆。将匀浆后的组织在-80°C下冷冻以裂解细胞。解冻后，在4°C下以10,000 × g离心15分钟。取上清液用于检测。

- 细胞裂解液：通过在4°C下以2,000 × g离心5分钟收集细胞（约400万细胞）。对于贴壁细胞，不要使用蛋白酶酶收获细胞，而是使用橡胶刮刀。在含有100 mM磷酸钾（pH 7.0）和2 mM EDTA的冷缓冲液中适当体积中匀浆或超声处理细胞。在4°C下以10,000 × g离心15分钟。取上清液用于检测。

- 所有样本可在-20°C至-80°C下保存至少一个月。

检测步骤

1. 试剂准备：在检测前将所有试剂平衡至所需反应温度（例如25°C）。使用前短暂离心试管。用120 uL去离子水溶解谷胱甘肽，涡旋混合。未使用的谷胱甘肽试剂在-20°C下冷冻可稳定保存三周。

2. 将每个样本的20 uL分别加入不同的孔中。

3. 按每孔计算，将184 uL检测缓冲液、1 uL溶解后的谷胱甘肽和1 uL CDNB混合，制备足够所有反应孔的工作试剂（WR）。向所有样本孔中加入180 uL WR，轻轻敲击孔板以混合。

4. 在0分钟时读取340 nm处的吸光度（OD???nm），并在0至10分钟之间至少再读取四个时间点的吸光度。如果条件允许，建议使用能够进行动力学测量的酶标仪，并设置为每分钟读取一次340 nm处的吸光度，持续10分钟。

所需材料（但未提供）

移液装置、离心管、透明平底96孔板（如VWR货号82050-760）和酶标仪。

实验示例

文献：

1. Csiszár, Jolán, et al. (2014). Glutathione transferase supergene family in tomato: Salt stress-regulated expression of representative genes from distinct GST classes in plants primed with salicylic acid. Plant Physiology and Biochemistry 78: 15-26.

2. Smeyne, Michelle, and Richard Jay Smeyne. (2013). Glutathione metabolism and Parkinson's disease. Free Radical Biology and Medicine 62: 13-25.

3. Watson, Mary A., et al. (1998). Human glutathione S-transferase P1 polymorphisms: relationship to lung tissue enzyme activity and population frequency distribution. Carcinogenesis 19.2: 275-280.

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。