BioAssay Systems 羟脯氨酸测定试剂盒-安全、简单且灵敏的定量检测样本中的羟脯氨酸

羟脯氨酸是一种独特的修饰氨基酸，仅存在于几种动物蛋白中，其中最常见的是胶原蛋白。胶原蛋白是细胞外基质的关键结构蛋白，因其惊人的强度而广泛存在于结缔组织中。由于胶原蛋白在动物中作为关键结构蛋白的作用，它在许多医学应用中至关重要，例如组织移植和复杂细胞培养的支架。胶原蛋白也用于美容行业，因为它可以补充以增加组织的硬度，从而使皮肤看起来更年轻。

BioAssay Systems的羟脯氨酸检测试剂盒提供了一种安全、简单且灵敏的方法，用于定量检测样本中的羟脯氨酸。在此方法的第一步中，样本中的羟脯氨酸被氧化为吡咯环。然后该化合物与染料试剂反应，产生一种可在560 nm处测量的粉红色产物。羟脯氨酸几乎仅存在于胶原蛋白中，因此羟脯氨酸含量可以用作胶原蛋白含量的替代指标。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品羟脯氨酸测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 安全。本羟脯氨酸检测采用改进的无高氯酸化学方法。

- 灵敏且准确。使用20 uL样本。96孔板检测的线性检测范围为0.5 ug/mL至50 ug/mL羟脯氨酸。

- 方便。胶原蛋白可以在Eppendorf管中水解，最终孵育可在37°C进行。

应用

- 直接检测：生物和化妆品样本中的羟脯氨酸和胶原蛋白。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）

- 试剂A：1 mL

- 氧化缓冲液：10 mL

- 试剂B：10 mL

- 羟脯氨酸标准品：200 uL

储存条件

试剂盒在室温下运输。收到后将试剂盒组分储存于4°C。有效期：收到后12个月。

注意事项

- 试剂仅供研究使用。打开前短暂离心试管。检测前将所有组分平衡至室温。使用试剂时需遵循实验室试剂的常规注意事项。详细信息请参阅材料安全数据表。

操作步骤

胶原蛋白样本水解：本试剂盒检测游离羟脯氨酸，因此任何含有胶原蛋白的样本在检测前必须进行水解。为了水解样本，将50 uL样本与50 uL 10N NaOH在Eppendorf管中混合。将管置于100?C加热1小时（注意：固体样本可能需要更长时间的水解）。让管冷却，然后用50 uL 10N HCl中和。用150 uL去离子水将样本按1:1稀释。离心管2分钟，将所有液体收集到管中并沉淀杂质。

生物液体样本（例如血清、细胞、尿液、组织裂解液）：首先离心以去除任何颗粒物。可能需要进行系列稀释，以确保样本在试剂盒的检测范围内。

96孔板操作步骤

1. 标准品准备：通过将20 uL 1 mg/mL羟脯氨酸标准品与380 uL去离子水混合，制备50 ug/mL羟脯氨酸标准品。然后按照下表描述，在1.5-mL离心管中制备标准品。

2. 将20 uL标准品和样本分别加入透明平底96孔板的不同孔中。

3. 每孔将8 uL试剂A与90 uL氧化缓冲液混合。向每孔加入90 uL该混合液。轻拍孔板以混合，并在室温下孵育10分钟。

4. 向所有孔中加入90 uL试剂B。加入试剂B后，孔会变得浑浊，您必须上下移液，直到浑浊消散。

5. 在37°C的酶标仪或孵育箱中孵育90分钟。

6. 在λ = 560 nm处读取吸光度（OD）。使用90分钟时间点的OD值进行分析。

所需材料（但未提供）

移液装置、离心管、10 N NaOH和HCl、透明平底96孔板、酶标仪、加热块或热水浴、孵育箱。

实验示例

96孔板中的羟脯氨酸和胶原蛋白检测

文献：

1. Parenteau-Bareil, R., Gauvin, R., & Berthod, F. (2010). Collagenbased biomaterials for tissue engineering applications. Materials, 3(3),1863-1887.

2. Chattopadhyay, S., & Raines, R. T. (2014). Collagen-Based Biomaterials for Wound Healing. Biopolymers, 101(8), 821.

3. Lee, A., et al (2019). 3D bioprinting of collagen to rebuild components of the human heart. Science, 365(6452), 482-487.

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。