β-葡萄糖醛酸苷酶(BG)是一种催化β-葡萄糖醛酸苷键水解的酶。在人体中,β-葡萄糖醛酸苷酶催化从糖蛋白和黏多糖(如肝素硫酸盐)中水解β-D-葡萄糖醛酸。β-葡萄糖醛酸苷酶的活性对药物代谢很重要,因为药物通常与葡萄糖醛酸结合,以形成更易溶于水的输送系统,依赖后续的β-葡萄糖醛酸苷酶活性来释放活性药物。胆红素的清除也通过葡萄糖醛酸化来实现。GUSB常被用作报告基因,通过β-葡萄糖醛酸苷酶活性来追踪基因表达。BioAssay Systems的荧光BG检测使用一种β-D-葡萄糖醛酸苷底物,该底物在β-葡萄糖醛酸苷酶水解后会发出荧光,并在365/450 nm处读取。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品β-葡萄糖醛酸酶测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
β-葡萄糖醛酸酶测定试剂盒 | BAS-DGCD-100 | 查看 |
主要特点:
- 极高灵敏度。该试剂盒的荧光性质可在96孔板中仅用10 uL样本,在30分钟内检测到1×10?? U/L至8 U/L的BG活性。
- 通用性强。该检测已验证可用于动物和大肠杆菌来源的β-葡萄糖醛酸苷酶。
- 高通量。均相“混合-孵育-测量”型检测。可轻松自动化,每天检测数千个样本。
应用:
- 用于定量测定组织和细菌样本中的β-葡萄糖醛酸苷酶活性。
试剂盒组成(96孔板,100次检测):
- 底物:4 mL
- 标准品:100 uL
- 终止试剂:1.5 mL
储存条件:
试剂盒在冰上运输。收到后将所有组分储存于-20°C。有效期:收到后6个月。
注意事项:
试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。
操作步骤:
该检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致,加入底物到样本中的操作应迅速,混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。可在室温或37°C下进行检测。
样本准备:
- 我们建议在样本准备中避免使用表面活性剂,如SDS或Triton 100-X。
- 组织:在解剖前,用磷酸盐缓冲液(pH 7.4)冲洗组织以去除血液。将组织(50 mg)在约200 uL裂解缓冲液中匀浆。
- 细胞裂解液:通过在4°C下以2,000 × g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞,不要使用蛋白酶酶收获细胞,而是使用橡胶刮刀。在适当体积的冷裂解缓冲液中匀浆或超声细胞。所有样本可以在-20至-80°C下储存至少一个月。
试剂准备:
将所有试剂盒试剂平衡至室温。倒置或轻轻涡旋试管和瓶子,确保试剂混合均匀。
标准品准备:
将5 uL提供的标准品与995 uL去离子水混合,制备100 uM预混液。按照下表准备标准品。
样本准备:
对于组织裂解液,我们建议在检测前用去离子水将样本稀释5-10倍。对于血清样本,可能需要15倍稀释。
1. 将10 uL标准品和10 uL样本分别加入黑色平底96孔板的孔中。
2. 向每个孔中加入40 uL底物。轻拍板子以混合。在室温或37°C下孵育30分钟。
3. 向每个孔中加入15 uL终止试剂。轻拍板子以混合。孵育15分钟。
4. 在λex/em = 365/450 nm处读取荧光。
该检测流程可轻松微型化,用于384孔或1536孔板。
所需材料(但未提供):
移液装置及配件(例如多通道移液器)、黑色平底96孔板(例如VWR货号89089-582)、离心管和酶标仪。
示例:
文献:
1. Matsushita-Oikawa, H, et al. (2006) Novel carbohydrate-binding activity of bovine liver β-glucuronidase toward lactose/N-acetyllactosamine sequences. Glycobiology, 16(10), 891-901.
2. Marathe, S. V., & McEwen, J. E. (1995). Vectors with the gus reporter gene for identifying and quantitating promoter regions in Saccharomyces cerevisiae. Gene, 154(1), 105-107
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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