BioAssay Systems 糖胺聚糖测定试剂盒- 用于定量测定食品和组织匀浆中的糖胺聚糖

糖胺聚糖（GAGs）是长链线性多糖，是哺乳动物组织细胞外基质的主要成分，具有高度负电荷。GAGs在细胞生长、细胞黏附、伤口修复和抗凝血中发挥关键作用。它们对大脑发育和稳态也很重要。GAGs与骨关节炎、炎症、糖尿病、脊髓损伤和癌症有关。BioAssay Systems的GAGs检测试剂盒采用浊度法反应，GAGs与试剂中的蛋白质形成不溶性复合物。在600 nm处的浊度增加与样本中的糖胺聚糖含量（以透明质酸当量表示）成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品糖胺聚糖测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点：

- 灵敏且准确。最少可使用40 uL样本。96孔板的线性检测范围：0.01 - 0.5 mg/mL透明质酸。

- 快速且便捷。操作过程仅需加入单一工作试剂并孵育10分钟。室温检测，无需37°C孵育器。

- 高通量。均相“混合-孵育-测量”型检测。可轻松自动化，每天检测数千个样本。

应用：

- 用于定量测定食品和组织匀浆中的糖胺聚糖。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）：

- 试剂：16 mL

- 标准品：0.8 mL（0.5 mg/mL透明质酸）

储存条件：  

试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分储存于-20°C。有效期：收到后6个月。

注意事项：  

试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。

操作步骤：

限制条件：

1. 与许多浊度法检测一样，许多因素（如样本基质成分、非特异性结合、对温度和混合的敏感性）可能会影响反应动力学。我们强烈建议每次检测都运行标准曲线，并且所有样本都在同一次检测中进行比较。

2. 不同类型的GAGs可能导致不同的信号强度和标准曲线形状。本检测以透明质酸当量报告结果，使用透明质酸作为GAGs标准。

样本准备：

- 组织和其他固体样本（如食品）：在解剖前，用1X PBS（pH 7.4）冲洗组织样本以去除血液。按照每毫克组织7.5 uL的比例，将样本和冰冷的1X PBS（pH 7.4）加入Dounce匀浆器中。我们建议至少使用15 mg样本，并尽可能保持样本质量一致。使用研杵匀浆20 - 40次（具体次数取决于样本类型；在实验中保持所有样本的研杵次数一致）。将匀浆液和任何剩余固体转移到一个新的1.5-mL微量离心管中。用与最初加入的等量PBS冲洗研杵和匀浆器内壁；将此冲洗液与匀浆液合并。在冰上超声处理90秒。以14,000 rpm离心5分钟。取上清液用于检测。

注意：阴离子物质（如SDS、胆酸钠等）会干扰检测，应在样本准备中避免使用。一些生物样本（如血清、血浆、尿液和脑脊液）中GAGs的含量太低，无法使用此检测方法检测。一些样本类型（如组织）需要样本空白（详见操作步骤）。

- 对于未知样本，建议测试几种稀释度以确定最佳样本稀释因子n。

试剂准备：  

将所有试剂平衡至25°C。使用前短暂离心试管。

计算：

从标准品的吸光度值中减去空白值（水，#6），并绘制ΔOD与标准品浓度的关系图。使用非线性拟合标准曲线，例如二次多项式方程。从样本孔的吸光度值中减去空白OD值。（如果使用了样本空白，则从样本中减去样本空白的OD值。）使用标准曲线方程确定样本中GAG的浓度。如果样本在检测前进行了稀释，则将结果乘以稀释因子。

注意：如果计算出的浓度高于0.5 mg/mL，需将样本用去离子水稀释后重新检测。将结果乘以稀释因子。

所需材料（但未提供）：  

移液装置及配件（例如多通道移液器）、透明平底96孔板（例如VWR货号82050-760）、离心管和酶标仪。如果需要固体样本准备：1X PBS（pH 7.4）、Dounce匀浆器、超声仪、离心机。

示例：

左：透明质酸标准曲线。右：样本按照协议处理并检测。

文献：

1. K?witsch A. et al (2018) Medical application of glycosaminoglycans: a review. J Tissue Eng Regen Med. 12(1):e23-e41.

2. Dong J. et al (2024) Metabolism mechanism of glycosaminoglycans by the gut microbiota: Bacteroides and lactic acid bacteria: A review. Carbohydr Polym. 332:121905.

3. Wieboldt R, L?ubli H. (2022) Glycosaminoglycans in cancer therapy.Am J Physiol Cell Physiol. 322(6):C1187-C1200. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。