BioAssay Systems α-l-岩藻糖苷酶测定试剂盒- 稳健且适合高通量筛选

α-L-岩藻糖苷酶（AFU）是一种由人类FUCA1基因编码的酶，能够催化L-岩藻糖的分解。这种酶的遗传性缺乏会导致一种神经黏脂沉积症——岩藻糖苷病，其特征是岩藻糖的积累。岩藻糖苷酶血清活性低下还与卵巢癌有关。在糖尿病、甲状腺功能亢进、肝硬化和肝炎患者中观察到岩藻糖苷酶血清活性升高。此外，其活性增加还与肺癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、子宫癌和肝癌有关。

BioAssay Systems的非放射性、比色法AFU检测基于从合成底物中水解4-硝基苯酚。加入终止试剂后，硝基苯酚会呈现强颜色反应。加入终止试剂后在405 nm处的吸光度增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品α-l-岩藻糖苷酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点：

- 高灵敏度和宽线性范围。线性检测范围（10 uL样本）：20分钟反应时间为1 - 100 U/L。

- 均相且简单的操作流程。简单的加样-混合-读取流程可在20分钟内可靠定量岩藻糖苷酶活性。

- 稳健且适合高通量筛选。所有试剂均适用于高通量液体处理仪器，可轻松自动化，每天测量数千个样本。

应用：

- 生物样本（如血浆、血清、组织、细胞裂解液等）中α-L-岩藻糖苷酶活性的测定。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）：

- 底物缓冲液：10 mL

- 终止试剂：12 mL

- 标准品：1 mL（12.5 mM硝基苯酚）

储存条件：  

试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分储存于-20°C。有效期：收到后6个月。

注意事项：  

试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。

操作步骤：

该检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，加入底物和终止试剂到样本中的操作应迅速，混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。

样本准备：

- 血清和血浆可以直接检测。

- 组织：在解剖前，用磷酸盐缓冲液（pH 7.4）冲洗组织以去除血液。将组织（50 mg）在含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）的缓冲液中匀浆。在4°C下以10,000 × g离心15分钟。取上清液用于检测。

- 细胞裂解液：通过在4°C下以2,000 × g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞，不要使用蛋白酶酶收获细胞，而是使用橡胶刮刀。在含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）的冷缓冲液中适当体积内匀浆或超声细胞。在4°C下以10,000 × g离心15分钟。取上清液用于检测。

- 所有样本可以在-80至-20°C下储存至少一个月。

试剂准备：  

将底物缓冲液平衡至所需的反应温度（例如25°C或37°C）。

标准品准备：  

将10 uL 12.5 mM硝基苯酚标准品与490 uL去离子水混合，制备250 uM标准品。

反应准备：

1. 将每个标准品（ODSTD）的100 uL分别加入透明平底96孔板的孔中。

2. 将每个样本的20 uL分别加入单独的孔中。向每个样本孔中加入80 uL底物。轻拍板子以混合。

3. 在25°C或所需温度下孵育20分钟。向每个孔中加入100 uL终止试剂。轻拍板子以混合。

4. 读取405 nm的吸光度。

注意：如果样本有颜色或不透明，则需要样本空白（ODBLANK）。向一个孔中加入20 uL样本，并加入80 uL去离子水。孵育后加入100 uL终止试剂。

标准曲线：

文献：

1. Giardina M.G. et al. (1992) Serum alpha-L-fucosidase. A useful marker in the diagnosis of hepatocellular carcinoma. Cancer. 70:1044-1048

2. Fernandez-Rodriguez AD. Et al. (2000) Value of the serum alpha-Lfucosidase activity in the diagnosis of colorectal cancer. Oncology 59(4): 310-316.

3. Alhadeff JA et al. (1975) Human liver alpha-L-fucosidase. Purification,characterization, and immunochemical studies. Journal Biol. Chem.250: 7106-7113.

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。