BioAssay Systems 双荧光素酶报告基因测定试剂盒-高灵敏度和宽检测范围

通过使用双报告基因系统可以提高报告基因检测的准确性。 

其中一个报告基因与感兴趣的启动子相关联，用于评估特定实验条件的影响，而第二个报告基因用作对照，提供基线反应。SuperLight?双荧光素酶报告基因检测法允许在单个样品中顺序测量两种不同荧光素酶（萤火虫荧光素酶[FFL]和海肾荧光素酶[RL]）的活性。首先通过加入FFL试剂来测量萤火虫荧光素酶的发光。接下来，向同一孔中加入RL试剂。RL试剂同时猝灭萤火虫荧光素酶的发光，并启动海肾荧光素酶反应。两种反应产生的光都可以方便地用发光仪进行测量。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品双荧光素酶报告基因测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点 

- 高灵敏度和宽检测范围：能够检测低至2飞克（fg）的荧光素酶。  

- 与常规实验室和高通量筛选（HTS）格式兼容：检测可在试管或微孔板中进行，并可使用任何发光仪进行测量。可在HTS液体处理系统上轻松自动化。  

- 快速便捷：三步检测法可在20分钟内完成双荧光素酶水平的检测。

应用 

- 基因调控：基因表达水平、启动子活性的特征、受体、转录因子和小分子对基因表达的调节。  

- 药物发现：用于基因调节剂的高通量筛选。

试剂盒内容（96孔板100次检测） 

- 裂解缓冲液：25毫升  

- FFL试剂：25毫克  

- 检测缓冲液：25毫升  

- RL试剂：400毫克  

可根据要求提供定制的大量试剂。

储存条件 

试剂盒在常温下运输。收到后将所有试剂储存于-20°C。保质期：收到后12个月。  

注意事项：试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

操作步骤 

- 试剂准备：建议在检测缓冲液中新鲜配制FFL和RL试剂。计算每次检测所需的每种试剂的用量（96孔板每孔100微升，384孔板每孔25微升），并称取足够的每种试剂（FFL试剂2毫克/毫升，RL试剂35毫克/毫升）。轻轻摇晃每种配制好的试剂，直至完全溶解（约10分钟）。配制好的FFL试剂在-20°C下储存时可稳定保存长达4周；然而，不建议长时间储存配制好的RL试剂，理想情况下应在4小时内使用。

数据分析 

发光强度（RLU）与荧光素酶浓度成正比。对于每个单独的样品，实验报告基因的RLU应通过对照报告基因的RLU进行标准化。  

上图：荧光素酶滴定实验，荧光素酶在细胞裂解液中稀释，并在96孔板中进行检测。  

左图：在HEK293细胞中滴定萤火虫荧光素酶质粒，以0.2微克的海肾荧光素酶质粒作为对照。在海肾荧光素酶检测过程中，99.97%的萤火虫荧光素酶发光被猝灭。

文献参考：

1. Paguio A, et al. (2010). Improved dual-luciferase reporter assays for nuclear receptors. Curr Chem Genomics. 4: 43-9.

2. Rakauskaite R, et al. (2011). A rapid, inexpensive yeast-based dualfluorescence assay of programmed--1 ribosomal frameshifting for high-throughput screening. Nucleic Acids Res. 39(14): e97.

3. Jia S, et al. (2011). Relative quantification of protein-protein interactions using a dual luciferase reporter pull-down assay system.PLoS One. 6(10): e26414

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。