蛋白质被称为“生命的基石”,是生命科学中最重要的大分子之一。蛋白质是由氨基酸组成的多肽,在生物学的各个方面发挥着各种关键作用。蛋白质定量是生命科学家们非常常见的操作。对于生命科学家来说,简单、直接且可自动化的蛋白质浓度测量程序是非常理想的。BioAssay Systems 的 QuantiChrom? 蛋白质检测试剂盒是基于改良的考马斯亮蓝 G 法。这种染料会与蛋白质特异性地形成蓝色复合物,其在 595 nm 处测量的颜色强度与样本中的蛋白质浓度成正比。经过优化的配方显著减少了原始样本中物质的干扰,并且对肽类的灵敏度有所提高。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品蛋白质测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
蛋白质测定试剂盒 | BAS-QCPR-500 | 查看 |
应用:
直接检测:总蛋白质浓度。
主要特点:
- 灵敏且准确:使用 10 ?L 样本。在 96 孔板检测中,检测范围为 0.06 - 1.0 mg/mL 蛋白质。
- 简单且高通量:“混合即读”程序涉及添加单一工作试剂并测量吸光度。可以轻松自动化为 96 孔板的高通量检测,每天可处理数千个样本。
- 低干扰:葡萄糖、Tris、维生素、氨基酸、DNA、RNA、盐类、EDTA(< 12 mM)、苯酚(< 50 mM)、尿素(< 0.6 M)、Triton(< 0.1%)和 SDS(< 0.1%)不会对检测产生干扰。
- 多功能性:检测可以在 96 孔板或比色皿中进行。
试剂盒内容(96 孔板进行 500 次检测):
- 试剂:20 mL 5 倍浓缩液
- 蛋白质标准品:1 mL 1.0 mg/mL 牛血清白蛋白(BSA)
储存条件: 该试剂盒在室温下运输。将试剂储存于 4°C,标准品储存于 -20°C。保质期:自收到之日起 12 个月。
注意事项: 试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。详细信息请参阅材料安全数据表。
试剂准备:
- 通过将 1 体积的 5 倍浓缩试剂加入 5 体积的蒸馏水中,准备足够量的工作试剂。在使用前将试剂恢复至室温。
使用 96 孔板的操作流程:
1. 按照表格所示稀释标准品。将 10 ?L 稀释后的标准品和稀释后的样本双份移入透明底部 96 孔板的孔中。将稀释后的标准品储存于 -20°C 以备后用。
2. 加入 200 ?L 工作试剂,轻轻敲击板子使其混合均匀。
3. 在 570 - 630 nm(峰值 595 nm)处测量吸光度。
使用比色皿的操作流程:
1. 按照 96 孔板检测的步骤准备标准品。将 50 ?L 稀释后的标准品和 50 ?L 样品移入比色皿中。
2. 加入 1000 ?L 工作试剂,轻轻敲击比色皿使其混合均匀。
3. 在 570 - 630 nm(峰值 595 nm)处测量吸光度。
计算:
- 从标准品的吸光度值中减去空白(水,#8)的吸光度值,并将吸光度值与标准品浓度作图。使用标准曲线来确定样本中的蛋白质浓度。
使用 96 孔板的操作流程:
- 移液装置及其配件。
- 空白 96 孔板(例如康宁 Costar 品牌)。
- 96 孔板读取器。
使用比色皿的操作流程:
- 比色皿和分光光度计。
一般注意事项:
- 如果蛋白质浓度 > 1 mg/mL,则需用蒸馏水稀释样本,并使用校准曲线范围内的吸光度值来计算样本中的蛋白质浓度。一旦试剂与样本混合,即可进行读取。通过将 50 ?L 样本加入 200 ?L 试剂中,可以实现高灵敏度检测(检测范围 3 - 200 ?g/mL)。
示例:
- 上图:标准操作流程。
- 下图:50 ?L 样本加上 200 ?L 试剂。
文献:
1. Sharifuzzaman SM, et al (2011). Subcellular components of probiotics Kocuria SM1 and Rhodococcus SM2 induce protective immunity in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum)against Vibrio anguillarum. Fish Shellfish Immunol. 30(1):347-53.
2. Cucchiarini M et al (2011). Metabolic activities and chondrogenic differentiation of human mesenchymal stem cells following recombinant adeno-associated virus-mediated gene transfer and overexpression of fibroblast growth factor 2. Tissue Eng Part A. 17(15-16):1921-33.
3. Olsen AS et al (2010). Limb regeneration is impaired in an adult zebrafish model of diabetes mellitus. Wound Repair Regen.18(5):532-42. Assay: Protein in rat tissue.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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