BioAssay Systems 精氨酸酶抑制剂筛选试剂盒-快速可靠，不到2小时内完成

精氨酸酶（L-精氨酸脲水解酶，EC 3.5.3.1）存在于哺乳动物和植物中。在人类中，精氨酸酶主要在肝脏中表达，也在乳腺、肾脏、睾丸、唾液腺、表皮和红细胞中少量表达。精氨酸酶催化精氨酸转化为鸟氨酸和尿素，这一过程对于抵御氨（NH?）毒性以及细胞生长和修复至关重要。过度的精氨酸酶活性与心血管疾病有关，还可能导致血管结构问题和神经毒性。研究表明，精氨酸酶抑制剂在心血管疾病和神经系统疾病的治疗中已被证明具有益处。

在研究和药物发现领域，用于测量精氨酸酶抑制的简单、直接且适合自动化的程序非常受欢迎。BioAssay Systems的精氨酸酶抑制剂筛选试剂盒提供了一种灵敏且便捷的方法来筛选精氨酸酶抑制剂。该方法利用一种显色剂，该显色剂能与精氨酸酶反应中产生的尿素特异性地形成有色复合物。颜色的强度与样本中的精氨酸酶活性成正比。通过比较经测试化合物预孵育的反应与未经处理的对照反应的颜色强度，可以确定测试化合物的抑制百分比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品精氨酸酶抑制剂筛选试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点：

- 安全：非放射性测定。

- 高通量：均质“混合-孵育-测量”型测定，可轻松在高通量筛选液体处理系统上自动化操作。

- 快速可靠：可在不到2小时内完成，无需37摄氏度加热器。

应用范围：

- 高通量筛选精氨酸酶抑制剂并评估其效果。

试剂盒组成（96孔板，100次测试）：

- 精氨酸缓冲液（pH 9.5）：1毫升

- 锰溶液：300微升

- 试剂A：12毫升

- 试剂B：12毫升

储存条件：

- 试剂盒在室温下运输。将精氨酸缓冲液储存于-20摄氏度，其他组分储存于2-8摄氏度。有效期：收到后12个月。

注意事项：

- 试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

操作步骤：

- 在测定前将所有试剂平衡至室温。底物缓冲液和尿素试剂应现配现用，并在2小时内使用完毕。

- 该测定基于酶催化的动力学反应。为确保孵育时间一致，加入工作试剂的操作应迅速，混合应简短但彻底。建议使用多通道移液器。注意：试剂盒中未包含精氨酸酶或对照抑制剂。

样本准备：

- 将测试化合物溶解于所选溶剂中。建议先测试所选酶对溶剂的耐受性。

- 以下协议针对人精氨酸酶I进行了优化。使用去离子水将纯化的精氨酸酶稀释至0.0012 U/微升。如果分析其他物种，建议您通过实验确定Km值，然后调整底物缓冲液中的精氨酸缓冲液体积，使50微升反应中的底物最终浓度接近Km值。

精氨酸酶反应准备：

1. 将40微升精氨酸酶分别加入不同的孔中。

2. 保留两个含有精氨酸酶的孔，一个用于空白，一个用于对照。

3. 向对照和空白孔中加入5微升测试化合物所溶解的溶剂。例如，如果测试化合物溶解于100体积百分比（v/v%）的DMSO中，则向这些孔中加入5微升100体积百分比（v/v%）的DMSO。

4. 向其余含有精氨酸酶的孔中加入5微升测试化合物。轻拍孔板以混合。

5. 在25摄氏度下孵育孔板15分钟。

6. 通过混合为每个孔准备足够的底物缓冲液（SB）：4微升精氨酸缓冲液和2微升锰溶液。向所有样本孔（除空白孔外）中加入5微升SB。向空白孔中加入5微升去离子水。轻拍孔板以混合。在25摄氏度下孵育孔板30分钟。

7. 尿素测定：通过混合等体积的试剂A和试剂B来准备尿素试剂。向所有孔中加入200微升尿素试剂。（注意：尿素试剂可终止精氨酸酶反应。）轻拍孔板以混合。在室温下孵育60分钟，并在430纳米处读取吸光度。

人精氨酸酶I与100体积百分比（v/v%）DMSO中的不同浓度的ABH共同孵育（在50微升反应中最终DMSO浓度为10体积百分比（v/v%））。

文献参考：

1. Segal, Robert, et al. (2012) Chronic oral administration of the arginase inhibitor 2 (S)-amino-6-boronohexanoic acid (ABH) improves erectile function in aged rats. Journal of andrology 33.6: 1169-1175.

2. Di Costanzo, Luigi, et al. (2005) Crystal structure of human arginase I at 1.29-? resolution and exploration of inhibition in the immune response.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 102.37: 13058-13063.

3. Pham, T. N., et al. (2016) Arginase inhibitors: from chlorogenic acid to cinnamides. Planta Medica 81.S01: P482

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。