BioAssay Systems EnzyFluo 人/小鼠RB(T821/826)磷酸化ELISA试剂盒解决方案

蛋白质磷酸化在细胞内调节蛋白质活性中发挥着关键作用。已知大量的蛋白激酶和磷酸酶参与多种信号转导途径。在生命科学研究和药物发现中，能够监测这些信号转导途径、靶蛋白磷酸化状态以及药物效应的快速检测方法是非常理想的。

视网膜母细胞瘤肿瘤抑制蛋白（Rb、RB1、pRb、视网膜母细胞瘤1、OSRC、PPP1R130、p105-Rb、pp110、视网膜母细胞瘤蛋白、RB转录共抑制因子1、p110-RB1）调节细胞分化、凋亡和细胞周期控制。BioAssay Systems的RB(T821/826)磷酸化ELISA试剂盒提供了一种快速灵敏的检测方法，用于测量培养细胞中的磷酸化蛋白pRB(T821/826)，并将磷酸化水平与同一孔中的总蛋白含量进行标准化。这种简单高效的检测方法省去了细胞裂解液的制备过程，可用于研究潜在的信号通路以及抑制剂、siRNA或激活剂对通路的影响。在此检测中，生长在96孔板中的细胞被固定和通透化。使用特异性一抗和辣根过氧化物酶（HRP）偶联的二抗以及荧光底物来检测RB(T821/826)的磷酸化，同时使用一种荧光试剂来测量同一孔中的总蛋白。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyFluo 人/小鼠RB(T821/826)磷酸化ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

改进版：总检测时间从标准的21小时缩短至6.5小时（实际操作时间2.5小时）。

简单便捷：细胞直接在96孔板中培养，无需细胞裂解。

准确且高通量：将蛋白磷酸化水平与同一孔中的总细胞蛋白进行标准化，极大地减少了孔间差异。可轻松自动化为高通量96孔板检测，每天可处理数千个样本。

应用

检测整细胞中RB(T821/826)的磷酸化状态。

评估激活剂、抑制剂、siRNA等对通路的调节作用。

已测试物种：人、小鼠、大鼠。

试剂盒组成

洗涤缓冲液：25毫升

封闭缓冲液：25毫升

蛋白染色液：6毫升

染料试剂：120微升

Ab1：10微升

Ab2（gM-HRP）：10微升

储存条件

试剂盒在运输过程中使用冰块包装。收到后，将所有试剂储存于-20℃。这些试剂的保质期约为收到后6个月。

注意事项

试剂仅供研究使用。使用这些试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

NIH 3T3细胞中RB(T821/826)磷酸化的诱导

将3×10⁴个NIH 3T3细胞接种于100微升培养基中，放入96孔板。经过37℃过夜培养后，细胞用50纳克/毫升的PDGFbb在无血清培养基中处理。使用ERBT-100试剂盒检测RB(T821/826)的磷酸化。

文献参考：

1. Cohen, P. (2002). The origins of protein phosphorylation. Nature Cell Biology. 4 (5): E127–130.

2. Smoly, I. et al (2017). An asymmetrically balanced organization of kinases versus phosphatases across Eukaryotes determines their distinct impacts". PLOS Computational Biology. 13 (1): e1005221.

3. Vlastaridis, P. et al (2017). Estimating the total number of phosphoproteins and phosphorylation sites in eukaryotic proteomes.GigaScience. 6 (2): 1–11 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。