BioAssay Systems EnzyChrom 丙酮酸测定试剂盒比色法操作步骤

丙酮酸是细胞代谢途径中的关键中间体。丙酮酸可以通过糖异生转化为碳水化合物，通过乙酰辅酶A转化为脂肪酸或产生能量，还可以转化为氨基酸丙氨酸和乙醇。丙酮酸水平异常与肝脏疾病和代谢紊乱有关。简单、直接且适合自动化的丙酮酸浓度检测方法在研究和药物发现中应用广泛。BioAssay Systems的丙酮酸检测使用单一工作试剂，将丙酮酸氧化酶和过氧化氢检测结合在一个步骤中完成。反应产物在570纳米处的吸光度或在激发/发射波长为530/585纳米处的荧光强度与样本中的丙酮酸浓度成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyChrom 丙酮酸测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

灵敏且准确：使用10微升样本。96孔板的线性检测范围为2至500微摩尔/升（17微克/分升至4.4毫克/分升）丙酮酸（比色法检测）和0.2至50微摩尔/升（荧光法检测）。

简单且便捷：操作过程只需加入单一工作试剂，在室温下孵育30分钟，适用于高通量筛选（HTS）检测。

改进的试剂稳定性：优化的配方显著增强了试剂和信号的稳定性。

应用

直接检测：用于生物样本中的丙酮酸检测。

药物发现/药理学：研究药物对丙酮酸代谢的影响。

试剂盒组成

酶混合物：10毫升

染料试剂：120微升

标准品：400微升（25毫摩尔/升丙酮酸）

储存条件

试剂盒在运输过程中使用干冰包装。收到后，所有试剂应储存在-20℃。保质期为收到后六个月。

注意事项

试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

比色法操作步骤

注意：含有巯基的试剂（例如巯基乙醇、DTT）可能会干扰此检测，应在样本制备中避免使用。

1. 平衡温度：将所有组分平衡至室温。通过将10微升25毫摩尔/升标准品与490微升水混合，制备500微摩尔/升标准品预混液。

2. 工作试剂制备：对于每个反应孔，在一个干净的试管中混合94微升酶混合物和1微升染料试剂。将90微升工作试剂转移到每个检测孔中。轻拍平板以混合。将未使用的试剂冷冻保存以备后续使用。

3. 孵育和读数：在室温下孵育30分钟。在570纳米（550-585纳米）处读取光密度。

文献参考：

1. Lopez-Cano, C et al (2020). Effect of type 2 diabetes mellitus on the hypoxia-inducible factor 1-alpha expression. Is there a relationship with the clock genes? Journal of Clinical Medicine, 9(8).

2. Chao, CC et al (2019). Metabolic control of astrocyte pathogenic activity via cpla2-mavs. Cell, 179(7), 1483-1498.e22.

3. Schoenrogge, M., Kerndl, H., Zhang, X., Kumstel, S., Vollmar, B.,& Zechner, D. (2018). alpha-cyano-4-hydroxycinnamate impairs pancreatic cancer cells by stimulating the p38 signaling pathway.Cellular signalling, 47, 101-108. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。