一氧化氮(NO)是一种反应性自由基,在许多关键生理功能中发挥着重要作用。 NO是精氨酸通过一氧化氮合酶(NOS)氧化的产物,参与宿主防御和发育、调节蛋白的激活以及与功能生物分子的直接共价相互作用。
简单、直接且非放射性的测量NOS的操作流程在研究和药物发现中越来越受欢迎。 BioAssay Systems的EnzyChrom?一氧化氮合酶检测试剂盒包含两个步骤:一个NOS反应步骤,在此期间产生NO,随后是一个NO检测步骤。由于NOS产生的NO会迅速被氧化为亚硝酸盐和硝酸盐,因此通过改进的Griess方法将硝酸盐还原为亚硝酸盐来测量NO的产生。该操作流程简单,样品预处理和检测所需的时间缩短至短短40分钟。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyChrom 一氧化氮合酶测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
EnzyChrom 一氧化氮合酶测定试剂盒 | BAS-ENOS-100 | 查看 |
主要特点
灵敏且准确。在96孔板中检测范围为0.25 - 25 U/L。
快速且可靠。如果在60°C下将NO??还原为NO??,可在40分钟内完成。
应用
直接检测:用于生物样本中的NOS活性。
药物发现/药理学:药物对NOS活性的影响。
试剂盒组成(96孔板,100次检测)
检测试剂缓冲液:10毫升
底物:600微升
GDH:120微升
试剂A:12毫升
试剂B:500微升
试剂C:12毫升
试剂D:干燥(2管)
试剂E:1.5毫升
硫酸锌:1毫升
标准品:1毫升
氢氧化钠:1毫升
储存条件
试剂盒在运输过程中使用冰块包装。将检测试剂缓冲液、底物、试剂D、试剂E和GDH储存于-20°C。将所有其他试剂储存于-20至4°C。保质期:收到后6个月。复溶后1周内使用试剂D。
注意事项
试剂仅用于研究。详细信息请参阅材料安全数据表。
计算
从标准OD值中减去空白OD(标准4)并绘制OD与标准浓度的关系图。使用线性回归拟合确定斜率。然后计算样本的NOS活性为
其中,ODSAMPLE和ODBLANK分别是样本和样本空白的吸光度值,t是反应时间(20分钟)。
单位定义:在检测条件下(pH 7.5和37°C),一单位的NOS每分钟催化产生1微摩尔的一氧化氮。
所需材料(但未提供)
移液装置、Eppendorf管、Eppendorf离心机、透明、平底的96孔板或比色皿、酶标仪或分光光度计以及加热块或热水浴(可选)。
一般注意事项
抗氧化剂和亲核试剂(例如β-巯基乙醇、谷胱甘肽、二硫苏糖醇和半胱氨酸)可能会干扰此检测。在样品准备过程中避免使用这些化合物。然而,如果必须使用β-巯基乙醇或二硫苏糖醇,则需要向标准品中添加等浓度的试剂。
文献参考:
1. Macit, C et al. (2020). The effects of calorie restriction and exercise on age-related alterations in corpus cavernosum. Frontiers in Physiology, 11.
2. Bonilla, E., et al. (2017). Minocycline Protection against Paraquat Toxicity in Drosophila melanogaster. Toxicology International, 24(1),65-73.
3. Kimura, K. et a.l (2016). Pleiotropic effects of linagliptin monotherapy on levels of nitric oxide, nitric oxide synthase, and superoxide dismutase in hemodialysis patients with diabetes. The Showa University Journal of Medical Sciences, 28(1), 9-17.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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