氨(NH3)或其离子形式铵(NH4+)是生物系统中重要的氮源。 它通过氨基酸代谢合成,在高浓度下具有毒性。在肝脏中,氨通过尿素循环转化为尿素。血液中氨水平升高(高氨血症)在肝功能障碍(如肝硬化)中被发现,而低氨血症则与尿素循环酶缺陷(例如鸟氨酸转氨甲酰酶)有关。
简单、直接且可自动化的测量NH?的操作流程在研究和药物发现中非常受欢迎。 BioAssay Systems的氨检测方法旨在直接测量NH3和NH4+。在此检测中,NADH在NH3、α-酮戊二酸和谷氨酸脱氢酶存在下转化为NAD+。在340纳米处的吸光度降低或在λem/ex = 450/360纳米处的荧光强度与样品中的NH3浓度成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyChrom 氨测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
EnzyChrom 氨测定试剂盒 | BAS-ENH3-100 | 查看 |
主要特点
高灵敏度和宽线性范围。使用20微升样品。线性检测范围为24至1000微摩尔/升氨。
均质且简单的操作流程。简单的“混合-测量”流程可在30分钟内可靠地定量NH?。
应用
直接检测:用于生物样本(例如血清、血浆、尿液、唾液、细胞培养等)中的NH?。
试剂盒组成(96孔板,100次检测)
检测试剂缓冲液:20毫升
酶:120微升
α-酮戊二酸:120微升
标准品:400微升
NADH试剂:干燥
储存条件
试剂盒在运输过程中使用冰块包装。收到后,将所有组分储存于-20摄氏度。保质期:收到后6个月,复溶后3周。
注意事项
试剂仅用于研究。使用试剂时应遵循实验室试剂的一般安全措施。详细信息请参阅材料安全数据表。
操作步骤
试剂准备:将所有组分平衡至室温。打开前短暂离心所有试管。用1000微升蒸馏水(dH?O)复溶NADH试剂管(最终浓度10毫摩尔/升)。复溶后的NADH试剂在-20摄氏度冷冻保存时可稳定3周。
样品准备:固体样品可通过在蒸馏水(dH?O)中匀浆并过滤、离心或在必要时脱蛋白以去除任何未溶解物质进行提取。样品应清澈、无色,pH值调整至7-8。
血清和血浆样品可直接检测。细胞培养基应在检测前用蒸馏水稀释5-10倍。
文献参考:
1. Jiang, S., Yan, W., Wang, S. E., & Baltimore, D. (2018). Let-7 suppresses B cell activation through restricting the availability of necessary nutrients. Cell metabolism, 27(2), 393-403.
2. Zhu, J., Zhu, X. G., Ying, S. H., & Feng, M. G. (2017). Effect of vacuolar ATPase subunit H (VmaH) on cellular pH, asexual cycle,stress tolerance and virulence in Beauveria bassiana. Fungal genetics and biology, 98, 52-60.
3. Ono, M., & Yoshiga, T. (2019). Cellular immunity in the insect Galleria mellonella against insect non-parasitic nematodes.Parasitology, 146(6), 708-715.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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