BioAssay Systems EnzyChrom 己糖激酶测定试剂盒，每天可处理数千个样本

己糖激酶（E.C. 2.7.1.1）是一种存在于线粒体和细胞质中的酶，是糖酵解途径中的第一个关键步骤。己糖（主要为葡萄糖）通过ATP磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸。己糖激酶与多种人类疾病有关，包括癌症和糖尿病。BioAssay Systems的非放射性、比色法己糖激酶检测方法基于NADPH偶联的酶促反应，通过还原四氮杂唑盐MTT生成一种在565 nm处有最大吸收峰的有色产物。在565 nm处吸光度的增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyChrom 己糖激酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

快速且灵敏：线性检测范围（20 uL样本）：15分钟反应时，检测范围为0.22至100 U/L。

便捷：均质“混合-孵育-测量”型检测。

高通量：可在高通量筛选液体处理系统上自动化操作，每天可处理数千个样本。

应用

己糖激酶活性测定：可用于生物样本（如微生物、血浆、血清、培养细胞、组织和培养基）中的己糖激酶活性测定。

试剂盒内容（96孔板，100次检测）

检测缓冲液：10 mL

酶A：120 uL

NADP/MTT：1 mL

酶B：120 uL

底物混合液：1 mL

校准液：1 mL

储存条件

试剂盒在运输过程中使用冰袋包装。收到后，请将所有组分储存于-20°C。保质期：收到后6个月。

注意事项

试剂仅供研究使用。使用这些试剂时，请遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

操作步骤

检测原理：本检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，向样本中加入工作试剂时应迅速，混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。检测可在任何期望的温度下进行（例如25°C或37°C）。

样本准备：

血清和血浆：可直接进行检测。

组织：解剖前，用磷酸盐缓冲液（pH 7.4）冲洗组织以去除血液。将组织（50 mg）在约200 uL含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）的缓冲液中均质化。在4°C下以10,000 × g离心15分钟。取上清液进行检测。

细胞裂解液：通过在4°C下以2,000 × g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞，不要使用蛋白酶来收获细胞，而是使用橡胶刮刀或细胞刮板。在含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）的冷缓冲液中适当体积内均质化或超声处理细胞。在4°C下以10,000 × g离心15分钟。取上清液进行检测。

所有样本：可在-20至-80°C下储存至少一个月。

试剂准备：将试剂平衡至期望的反应温度（例如25°C或37°C）。使用前短暂离心试管。通过混合以下成分制备足量的工作试剂（WR），用于所有检测孔：对于每个96孔检测，需8 uL底物混合液、8 uL NADP/MTT溶液、1 uL酶A、1 uL酶B和70 uL检测缓冲液。

文献参考：

1. De Jesus, A et al (2022) Hexokinase 1 cellular localization regulates the metabolic fate of glucose. Mol. Cell. 82:1261-1277.

2. Patra, KC et al (2013) Hexokinase 2 is required for tumor initiation and maintenance and its systemic deletion is therapeutic in mouse models of cancer. Cancer Cell. 24: 213-228.

3. Wasserman, DH (2022) Insulin, Muscle Glucose Uptake, and Hexokinase:Revisiting the Road Not Taken. Physiology (Bethesda). 37: 115-127. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。