BioAssay Systems【干冰】EnzyChrom 辅酶A检测试剂盒解决方案

辅酶A（CoA）参与了许多重要的生物活动，包括脂肪酸的合成与氧化、柠檬酸循环中的丙酮酸氧化等。辅酶A最重要的作用之一是携带和转移酰基。BioAssaySystems的方法提供了一种简单、两步法且高通量的辅酶A检测方法。在该检测中，第一步通过酶反应将辅酶A转化为酰基辅酶A，第二步将酰基辅酶A氧化生成反烯酰基辅酶A和H?O?。生成的H?O?与一种特异性染料反应，形成粉红色产物。在570nm处的吸光度或荧光强度（530/585nm）与样本中的辅酶A浓度成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品【干冰】EnzyChrom 辅酶A检测试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

-灵敏。使用10uL样本。线性检测范围：比色法检测为5到1000uM辅酶A，荧光法检测为3到100uM辅酶A。

-便捷。常温“混合即读”操作可轻松自动化，每天可处理数千个样本。

应用

-检测：多种生物样本中的辅酶A。

试剂盒组成

-检测缓冲液：20mL

-染料试剂：120uL

-酶A：干燥

-酶B：120uL

-底物：600uL

-标准品：50uL

-ATP：120uL

储存条件：试剂盒在运输过程中使用冰袋冷藏。收到后，请将所有组分储存于-20°C。有效期：自收到之日起六个月。

注意事项：试剂仅供研究使用。使用试剂时，请遵循实验室试剂的常规操作注意事项。详细信息请参考材料安全数据表。

操作步骤

试剂准备

-通过向酶A管中加入120uL去离子水来复溶酶A。通过上下移液确保酶A完全溶解，并在室温下孵育15分钟。将复溶后的酶A储存于-20°C，并在2个月内使用。

比色法检测

-液体样本（如血清和血浆）可直接检测。牛奶和固体样本可在水中加入5%异丙醇和5%TritonX-100后匀浆，随后通过0.45umPTFE针头滤器（例如VWRCat#28145-493）过滤。

-注意：含有巯基的试剂（例如β-巯基乙醇、二硫苏糖醇，>5uM）、叠氮化钠、EDTA和十二烷基硫酸钠已知会干扰此检测，应在样本准备中避免使用。

-1.将所有组分平衡至室温。打开前短暂离心试剂管。检测过程中将解冻的试剂管置于冰上。

-重要提示：解冻后的标准品溶液应为澄清且无色。如果底物溶液浑浊，请将其置于37°C并轻轻旋转试管（不要涡旋），直到溶液澄清。

-2.标准品：通过将5uL100mM标准品用495uL检测缓冲液稀释，制备1000uM的标准品储备液。

以下物质会干扰检测，应在样本准备中避免使用：抗坏血酸、SDS（>0.2%）、叠氮化钠、NP-40（>1%）和Tween-20（>1%）。

文献参考：

1. Veloso D, Veech RL. (1975). Enzymatic determination of long-chain fatty acyl-CoA. Methods Enzymol. 35:273-278.

2. Okabe H, et al. (1980). Enzymic determination of free fatty acids in serum. Clin Chem. 26:1540-1543.

3. Matsubara C, et al. (1983). A spectrophotometric method for the determination of free fatty acid in serum using acyl-coenzyme A

synthetase and acyl-coenzyme A oxidase. Anal Biochem. 130:128-133. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。