吡啶核苷酸在代谢中发挥着重要作用,因此,监测其浓度水平一直备受关注。 NAD?/NADH的定量测定在涉及细胞或组织能量转换和氧化还原状态的研究中具有应用价值。简单、直接且适合自动化的NAD?/NADH浓度测量程序非常受欢迎。BioAssay Systems的EnzyChrom? NAD?/NADH检测试剂盒基于乳酸脱氢酶循环反应,其中生成的NADH还原甲臜(MTT)试剂。在565 nm处测量的还原产物颜色强度与样本中的NAD?/NADH浓度成正比。该检测对NAD?/NADH具有高度特异性,且受NADP?/NADPH的干扰极小(<1%)。我们的检测方法是一种方便测量NAD、NADH及其比例的方法。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品【干冰】EnzyChrom NAD/NADH检测试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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【干冰】EnzyChrom NAD/NADH检测试剂盒 | BAS-E2ND-100 | 查看 |
应用:
直接检测:细胞或组织提取物中的NAD?/NADH浓度及其比例。
主要特点:
灵敏且准确。96孔板检测的检测限为0.05 uM,线性范围可达10 uM NAD?/NADH。
方便。操作步骤简单,只需加入一种工作试剂,并在室温下分别于0时刻和15分钟时读取吸光度。
高通量。可作为高通量96孔板检测方法,每天可处理数千个样本。
试剂盒组成:
检测缓冲液:10 mL
酶A:120 uL
乳酸:1.5 mL
酶B:120 uL
MTT溶液:1.5 mL
NAD标准品:0.5 mL
NAD(P)/NAD(P)H提取缓冲液:各12 mL
储存条件:试剂盒在冰上运输。将所有试剂储存于-20°C。保质期:收货后6个月。
注意事项:试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
一般注意事项:
1. 在这些浓度下,NAD和NADH的标准曲线是相同的。由于溶液中的NADH不稳定,我们仅提供NAD作为标准品。
2. 该检测基于酶催化的动力学反应。加入工作试剂应迅速,混合应简短但要充分。推荐使用多通道移液器。
3. 以下物质会干扰检测,应在样本准备中避免使用:EDTA(>0.5 mM)、抗坏血酸、SDS(>0.2%)、NaN?、NP-40(>1%)和Tween-20(>1%)。
4. 对于含有高于100 uM丙酮酸的样本,我们建议使用内标。
文献参考:
1. Maeda, T., et al (2021). Relevance of nadh dehydrogenase and alternative two-enzyme systems for growth of corynebacterium
glutamicum with glucose, lactate, and acetate. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, 8.
2. Nonaka, D., et al (2021). Metabolic engineering of 1,2-propanediol production from cellobiose using beta-glucosidase-expressing E. coli.Bioresource Technology, 329, 124858.
3. Di Magno, L., et al (2020). Phenformin inhibits hedgehog-dependent tumor growth through a complex i-independent redox/corepressor module. Cell Reports, 30(6), 1735-1752.e7.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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