BioAssay Systems 果胶酶测定试剂盒-生物样本中的果胶酶活性测定

果胶酶（EC 3.2.1.15）是一种能够催化果胶水解的酶。果胶是一种主要存在于陆生植物的中胶层和细胞壁中的杂多糖。在果实成熟过程中，包括果胶酶在内的酶会分解中胶层，使细胞分离并使果实变软。果胶酶在食品工业中被用于液化果肉、澄清果汁和葡萄酒。

BioAssay Systems 的 DPEC-100 试剂盒提供了一种快速便捷的果胶酶活性检测方法。在此方法中，底物果胶与检测试剂形成混浊复合物。在 600 nm 处测量的浊度与未水解果胶的量成正比，因此与果胶酶活性成反比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品果胶酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点：

- 灵敏且准确。在 96 孔板检测中，果胶酶活性的线性检测范围为 9.2-100 U/L。

- 简单且高通量。简单便捷的 40 分钟“添加-混合-测量”型检测。高通量格式，兼容实验室液体处理系统。无需加热。

- 安全。该试剂盒不使用有毒材料。参考已建立的 DNS 方法。

应用：

- 生物样本中的果胶酶活性测定（例如植物、真菌组织、果汁、细菌）。

试剂盒内容（96 孔板 100 次检测）：

- 果胶：8 mL

- 试剂：15 mL

- 校准液：500 uL

储存条件：试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分储存于 -20°C。保质期：收到后 12 个月。

注意事项：样本应不含果胶，不混浊且无深色。吸收 600 nm 波长的有色样本可能需要在检测前稀释。

操作步骤：

- 为确保相同的孵育时间，添加果胶到样本中的操作应迅速。建议使用多通道移液器。孵育后添加试剂时也应如此。为准确测定果胶酶活性，检测应在 25°C 下孵育。

- 样本准备：固体样本可在 100 mM 醋酸缓冲液（pH 4.0）中均质化。以 14,000 rpm 离心 5 分钟，取上清液用于检测。样本必须澄清且无颗粒。

- 试剂准备：检测前将所有试剂盒组分平衡至室温。使用前短暂离心试管。

- 校准液准备：

1. 将 200 uL 的 H?O 转移至 96 孔板的两个孔中。向一个孔中加入 20 uL 的 H?O（ODH?O），向另一个孔中加入 20 uL 的校准液（ODcal）。上下移液混合校准液。

- 反应准备：

1. 将每个样本的 20 uL 转移至不同的孔中。另外在另一个孔中加入 20 uL 的 H?O 作为空白。向每个样本孔和空白孔中加入 60 uL 的果胶。轻轻敲击平板以混合。

2. 在室温下孵育 30 分钟。向每个样本和空白孔中加入 140 uL 的试剂。轻轻敲击平板以混合。等待 10 分钟后，在 600 nm 处读取光密度。

所需材料（但未提供）：

- 移液装置及配件（例如多通道移液器）、透明平底 96 孔板（例如 VWR 编号 82050-760）、离心管和酶标仪。如果需要离心混浊样本，则需要离心机。

实例：

酶滴定使用纯化的果胶酶（Sigma 编号 P4716）。果胶酶在 100 mM 醋酸缓冲液（pH 4.0）中稀释，并按照标准协议进行检测。

成熟（“黄色”）和绿色香蕉（Musa acuminata）中的果胶酶活性。香蕉果实和果皮被分离后，在 100 mM 醋酸缓冲液（pH 4.0）中均质化。上清液中的果胶酶按照标准协议进行双份检测。

文献：

1. Oumer, O. J., & Abate, D. (2018). Screening and Molecular Identification of Pectinase Producing Microbes from Coffee Pulp.Biomed Res Int. 2018: 2961767.

 2. Bhadrecha, P., Bala, M., Khasa, Y. P., Arshi, A., Singh, J., & Kumar, M.(2020). Hippophae rhamnoides L. rhizobacteria exhibit diversified cellulase and pectinase activities. Physiology and molecular biology of plants, 26(5),1075-1085.

3. Jiang, X., Lu, Y., & Liu, S. Q. (2020). Effects of pectinase treatment on the physicochemical and oenological properties of red dragon fruit wine fermented with Torulaspora delbrueckii. Lwt 132, 109929. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。