BioAssay Systems α-甘露糖苷酶试剂盒-可轻松在高通量筛选液体处理系统上自动化操作

α-甘露糖苷酶（AMA）是一种催化甘露糖α形式裂解的酶。 α-甘露糖苷酶有助于在溶酶体中分解糖蛋白中的复杂糖类。缺陷或活性不足的AMA会导致α-甘露糖苷症，并引起儿童中枢神经系统的恶化。BioAssay Systems的非放射性、比色法AMA检测基于从合成底物上裂解4-硝基苯酚。加入终止试剂后，硝基苯酚会呈现强烈的颜色。加入终止试剂后在405 nm处的吸光度增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品α-甘露糖苷酶试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 快速且灵敏。线性检测范围（10 ?L样本）：10分钟反应时间为1至250 U/L。

- 便捷且高通量。均质“混合-孵育-测量”型检测。可轻松在高通量筛选液体处理系统上自动化操作，每天可处理数千个样本。

应用

- 生物样本（如血浆、血清、组织和培养基）中α-甘露糖苷酶活性的测定。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）

- 底物缓冲液：10 mL

- 终止试剂：12 mL

- 标准品：1 mL（12.5 mM硝基苯酚）

储存条件

- 试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分存于4°C。

- 保质期：收到后6个月。

注意事项

- 试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

操作程序

- 本检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，向样本中加入底物和终止试剂应迅速，混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。

样本准备

- 血清和血浆可以直接检测。

- 组织：解剖前，用磷酸盐缓冲液（pH 7.4）冲洗组织以去除血液。将组织（50 mg）在约200 ?L含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）的缓冲液中匀浆。在4°C下以10,000 x g离心15分钟。取上清液进行检测。

- 细胞裂解液：通过在4°C下以2,000 x g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞，不要使用蛋白酶收获细胞，而是使用橡胶刮刀。在适当体积的冷缓冲液中匀浆或超声细胞，缓冲液中含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）。在4°C下以10,000 x g离心15分钟。取上清液进行检测。

- 所有样本可在-80至-20°C下至少保存一个月。

试剂准备

- 将底物缓冲液平衡至所需反应温度（例如25°C或37°C）。

反应准备

1. 将每个标准品（ODSTD）的100 ?L分别移至透明平底96孔板的孔中。

2. 将每个样本的10 ?L分别移至不同的孔中。向每个样本孔中加入90 ?L底物。轻拍板以混合。

3. 在25°C或所需温度下孵育10分钟。向每个孔中加入100 ?L终止试剂。轻拍板以混合。

4. 读取405 nm处的吸光度（OD405nm）。

- 注意：如果您的样本有颜色或不透明，则需要准备样本空白（ODBLANK）。向一个孔中加入10 ?L样本，并加入90 ?L去离子水。孵育后加入100 ?L终止试剂。

所需材料（但未提供）

- 移液装置及配件（例如多通道移液器）、透明平底96孔板（例如VWR货号82050-760）、离心管和酶标仪。

实例

文献参考：

1. Rajesh, T et. al. (2013) Putative Role of a Streptomyces coelicolor-Derived α-Mannosidase in Deglycosylation and Antibiotic Production. Appl Biochem Biotechnol. [Epub ahead of print]

2. Nem?ovi?ová, I et. al. (2013) Characterization of Class I and II αMannosidases from Drosophila melanogaster. Glycoconj J. 30(9):899-909.

3. Rangarajan, M et. al. (2013) Characterization of the α- and β-Mannosidases of Porphyromonas gingivalis. J Bacteriol. 195(23):5297-307.

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。