BioAssay Systems 乙酰胆碱酯酶试剂盒-灵敏且准确，检测范围为10到600 U/L

乙酰胆碱酯酶（EC 3.1.1.7，AChE），也称为红细胞胆碱酯酶，主要存在于血液和神经突触中。血清胆碱酯酶活性降低可能与接触杀虫剂或某些变异基因型有关。AChE催化神经递质乙酰胆碱水解为胆碱和乙酸，这一反应对于胆碱能神经元在激活后恢复到静息状态是必需的。细胞和血浆中的胆碱酯酶水平被用作评估与有机磷杀虫剂接触和暴露的安全预防措施的依据，以及确定工人是否需要从接触这些杀虫剂的区域撤离的依据。

简单、直接且适合自动化的检测乙酰胆碱酯酶（AChE）活性的程序是非常理想的。BioAssay Systems的QuantiChrom?乙酰胆碱酯酶检测试剂盒基于改进的Ellman方法，其中乙酰胆碱酯酶作用产生的硫醇胆碱与5,5'-二硫代双（2-硝基苯甲酸）形成黄色物质。在412 nm处测量的产物颜色强度与样本中的酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品乙酰胆碱酯酶试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

应用：直接检测血液、血清、血浆和其他生物样本中的乙酰胆碱酯酶活性。评估乙酰胆碱酯酶抑制剂。

储存条件：试剂盒在室温下运输。收到后将所有试剂储存于室温。保质期：收到后6个月。

注意事项：试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。

实验步骤：

样本准备：

- 血液样本应在检测缓冲液中稀释40倍，例如准确移取5 ?L血液并充分混合于195 ?L检测缓冲液中。

- 组织或细胞裂解液通过在0.1M磷酸盐缓冲液（pH 7.5）中短暂超声或匀浆制备，随后以14,000 rpm离心5分钟。使用上清液进行检测。

- 最好使用新鲜样本进行检测。如果无法做到，应将样本冷藏，并在24小时内完成检测。

试剂准备：工作试剂应现配现用，并在30分钟内使用。每个反应孔需要2 mg试剂。根据所需量称取相应重量（mg）的试剂于离心管中。每2 mg试剂加入200 ?L检测缓冲液。涡旋溶解。

实验操作：

1. 校准液：将200 ?L水和200 ?L校准液分别加入透明底部96孔板的孔中。

- 样本：在单独的孔中每孔加入10 ?L样本。

2. 反应：将190 ?L新制备的工作试剂加入所有样本孔中，轻轻敲击平板以混合均匀。

- 在平板读数器上分别于2分钟和10分钟读取412 nm的吸光度。

3. 计算：乙酰胆碱酯酶活性按以下公式计算：

其中OD10和OD2是样品在10℃下的OD412nm值分别为1分钟和2分钟。ODCAL和ODH2O是OD412nm10分钟时校准器和水的值。n是稀释系数（全血n=40）。数字“200”是等价的校准品在测定条件下的活性。

注意：如果未考虑稀释倍数的AChE活性高于600 U/L，需用检测缓冲液进一步稀释样本并重复检测。将结果乘以稀释倍数。

单位定义：在检测条件下（pH 7.5和室温），每分钟催化产生1 ?mol硫醇胆碱的酶量为1个单位。

主要特点：

- 灵敏且准确。96孔板检测中乙酰胆碱酯酶活性的检测范围为10到600 U/L。

- 便捷。操作流程包括加入单一工作试剂，并在室温下分别于2分钟和10分钟读取吸光度。

- 高通量。可以轻松作为高通量96孔板检测，每天检测数千个样本。

试剂盒内容（96孔板100次测试）：

- 检测缓冲液（pH 7.5）：30 mL

- 试剂：240 mg

- 校准液：4 mL（相当于200 U/L）

示例：

使用96孔板协议对两份人血样本进行双份检测。AChE活性分别为3,402 ± 163和3,660 ± 151 U/L。

在96孔板中0-1000 U/L乙酰胆碱酯酶反应的动力学。

0-1000U/L乙酰胆碱酯酶在96孔板中的反应动力学

文献参考：

1. Ketenci, S. et al (2020). The neurochemical effects of prazosin treatment on fear circuitry in a rat traumatic stress model. Clinical Psychopharmacology and Neuroscience, 18(2), 219-230.

2. Hafiz, Z. Z., et al (2020). Inhibitory effects of raw-extract centella asiatica (Reca) on acetylcholinesterase, inflammations, and oxidative stress activities via in vitro and in vivo. Molecules (Basel,Switzerland), 25(4).

3. Voorhees, J. R., et al (2019). Occupational-like organophosphate exposure disrupts microglia and accelerates deficits in a rat model of Alzheimer 's disease. NPJ Aging and Mechanisms of Disease,5, 3. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。