BioAssay Systems 抗氧化测定试剂盒-5分钟的试剂孵育时间允许快速样本检测

2,2'-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（ABTS?）是一种绿色的阳离子自由基，被还原时会恢复到无色状态。ABTS实验被广泛用于测量抗氧化能力，即食品和生物系统中的氧化还原分子清除自由基的能力。BioAssay Systems的ABTS抗氧化实验通过测量ABTS自由基被还原和从绿色褪色为透明时发生的吸光度变化来实现。在650 nm处的吸光度降低与抗氧化剂浓度成正比，并与特罗洛克斯（Trolox）抗氧化标准曲线进行比较。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品抗氧化测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点：

- 快速便捷。5分钟的试剂孵育时间允许快速样本检测。

- 适应性强。与水相和乙醇提取的样本兼容，稳定的信号允许延长运行时间（长达2小时）。

- 高通量。均相“混合-孵育-测量”型实验。可以轻松自动化，每天检测数千个样本。

应用：

用于定量检测食品、饮料和尿液样本中的抗氧化能力。

试剂盒内容（96孔板100次测试）：

- ABTS试剂：20 mL

- 3% H?O?：20 ?L

- 特罗洛克斯标准品：100 ?L

- 过氧化氢酶（HRP）：100 ?L

储存条件：试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分储存于-20°C。保质期：收到后6个月。

注意事项：试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。

实验步骤：

样本准备：避免使用洗涤剂和还原剂（DTT、2-巯基乙醇、谷胱甘肽等）。

- 植物或食品提取物：将样本在水相或乙醇溶液中匀浆。如果提取液为酸性或碱性，应在检测前将样本中和。如果样本含有颗粒或浑浊，离心后使用澄清的上清液进行检测。

- 尿液：根据水分水平，将尿液样本稀释5到20倍。对于未知样本，建议测试几种稀释度以确定最佳样本稀释因子（n）。

试剂准备：将所有组分恢复至室温，并在检测前短暂涡旋混合。

96孔板操作步骤：

1. 标准品准备：将16 ?L特罗洛克斯标准品（50 mM）与984 ?L去离子水或样本制备液（例如乙醇）混合，制备1000 ?L 800 ?M预混液。按照表中描述在1.5-mL离心管中稀释标准品。将20 ?L标准品分别转移到透明平底96孔板的单独孔中。

2. 将每个样本的20 ?L分别转移到单独的孔中。

3. 通过混合2 ?L 3% H?O?和86 ?L去离子水制备20 mM H?O?。注意：20 mM H?O?不稳定，每次检测时需现配。

4. 为所有标准品和样本孔准备足够的工作试剂（WR）：对于每个孔，混合190 ?L ABTS试剂、1 ?L 20 mM H?O?和1 ?L HRP。首先混合ABTS试剂和H?O?，然后加入HRP。短暂混合后在室温下孵育5分钟。

5. 向所有样本和标准品孔中加入180 ?L工作试剂。轻轻敲击平板，充分混合。如果观察到一些浑浊，持续敲击平板直至溶解。

6. 在30分钟或更长时间（<2小时）后，在650 nm处读取吸光度。

需要但未提供的材料：

移液装置及配件（例如多通道移液器）、透明平底96孔板（例如VWR货号82050-760）、离心管、平板读数器以及样本提取所需材料。

左图：特罗洛克斯标准曲线；右图：样本使用标准协议进行检测。

文献参考：

1. Garc?a-Alonso, et al. (2004). Evaluation of the antioxid ? ant properties of fruits. Food chemistry, 84(1), 13-18.

2. Gupta, D. (2015). Methods for determination of antioxidant capacity: A review. International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research, 6(2), 546.

3. Niki, E. (2010). Assessment of antioxidant capacity in vitro and in vivo. Free Radical Biology & Medicine, 49(4), 503-515. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。