BioAssay Systems 乳酸脱氢酶试剂盒-直接检测血清、血浆及其他来源中的LDH活性

乳酸脱氢酶（LDH） 是一种氧化还原酶，能够催化乳酸和丙酮酸之间的相互转化。当疾病或损伤影响含有LDH的组织时，细胞会将LDH释放到血液中，在那里其水平会高于正常值。因此，LDH通常被用于评估组织或细胞损伤的存在。这种非放射性比色LDH实验基于四氮唑盐MTT在NADH偶联的酶促反应中被还原为一种还原形式的MTT，其在565 nm处有最大吸收峰。形成的紫色强度与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品乳酸脱氢酶试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点： 

- 高灵敏度和宽线性范围。使用3 ?L血清或血浆样本。检测限为2 IU/L，线性范围可达200 IU/L。

- 均相且简单的操作流程。简单的“混合-测量”操作流程可在30分钟内可靠地定量LDH活性。

- 稳定且适用于高通量筛选（HTS）。所有试剂均与高通量液体处理仪器兼容。

应用： 

- 直接检测：血清、血浆及其他来源中的LDH活性。

- LDH生产中的特性分析与质量控制。

- 药物发现：筛选和评估LDH调节剂。

试剂盒内容（96孔板100次测试）： 

- 底物缓冲液：20 mL

- 二氢硫色素：120 ?L

- NAD溶液：1 mL

- 校准液：1.5 mL

- MTT溶液：1.5 mL

储存条件： 试剂盒在常温下运输。收到后将所有组分储存于-20°C。保质期：收到后6个月。

注意事项： 试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。

实验步骤： 

本实验基于动力学反应。为确保孵育时间一致，向样本中加入工作试剂时应迅速且混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。实验可在室温（25°C）或37°C下进行。

样本准备： 

- 血清和血浆可直接用于实验。

- 组织：解剖前，用磷酸盐缓冲液（pH 7.4）冲洗组织以去除血液。每克组织在含有100 mM磷酸钾（pH 7.0）和2 mM EDTA的5 mL缓冲液中匀浆。在4°C下以10,000 x g离心15分钟。取上清液用于实验。

- 细胞裂解液：通过在4°C下以2,000 x g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞，不要使用蛋白酶收获细胞，而是使用橡胶刮刀。在适当体积的冷缓冲液（含有100 mM磷酸钾，pH 7.0和2 mM EDTA）中匀浆或超声处理细胞。在4°C下以10,000 x g离心15分钟。取上清液用于实验。

- 所有样本可在-20到-80°C下储存至少一个月。

试剂准备： 将试剂平衡至所需的反应温度（例如25°C或37°C）。使用前短暂离心试剂管。

通过混合以下试剂为所有样本孔准备足够的工作试剂（WR）：对于每个孔，加入14 ?L MTT溶液、8 ?L NAD溶液、1 ?L二氢硫色素和175 ?L底物缓冲液。建议现配现用。

示例：

使用96孔板协议对样本进行实验。人类血清的LDH活性为41 IU/L，大鼠血清为220 IU/L，胎牛血清为88 IU/L。

在96孔板实验中，随着血清浓度的增加，LDH反应的动力学。

文献参考：

1. Gabel, M et al (2020). Annexin A2 Egress during Calcium-Regulated Exocytosis in Neuroendocrine Cells. Cells, 9(9), E2059.

2. Sharabi, K. et al (2017). Selective chemical inhibition of PGC-1alpha gluconeogenic activity ameliorates type 2 diabetes. Cell, 169(1), 148-160.

3. Demers, M., et al. (2011). Increased efficacy of breast cancer chemotherapy in thrombocytopenic mice. Cancer Res 71(5):1540-9. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。