BioAssay Systems CellQuanti Blue 细胞活力测定试剂盒-灵敏且准确，低至100个细胞可以被准确定量

这种均相实验仅需简单地向细胞培养物中加入单一试剂——CellQuanti-Blue 试剂，经过孵育步骤后，测量荧光强度（激发波长 = 530 - 570 nm，发射波长 = 590 - 620 nm）。CellQuanti-Blue 试剂与其他基于还原酶的实验（如Alamar Blue试剂）类似，利用了非荧光的还原酶染料Resazurin。这种染料在代谢活跃的细胞还原作用下，会转化为一种高荧光产物（Resorufin）。活细胞能够轻易还原这种无毒试剂，而由此产生的荧光强度增加可以方便地通过荧光分光光度计或平板读数器进行监测。非活性细胞没有代谢能力，因此不会还原这种染料。因此，该实验中观察到的荧光强度是活细胞数量的真实反映。

CellQuanti-Blue 试剂经过优化，具有最高的灵敏度、重复性和较长的保质期。这种均相细胞实验可以在多孔板中进行。该试剂与所有培养基和高通量筛选应用中的液体处理系统兼容，适用于96孔和384孔板。应用范围包括细胞增殖、细胞毒性检测和细胞凋亡。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品CellQuanti Blue 细胞活力测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点：

- 安全。非放射性实验（与H-胸苷掺入实验相比）。

- 灵敏且准确。低至100个细胞可以被准确定量。

- 节省时间。在96孔和384孔板中进行的高通量实验允许每天同时处理数万个样本。

- 均相且便捷。单一试剂，“混合-孵育-测量”型实验。无需洗涤和试剂转移步骤。

- 稳定且适用于高通量筛选（HTS）：在96孔和384孔板中，Z'因子通常为0.6到0.9。可以轻松在HTS液体处理系统上自动化操作。

应用：

- 细胞增殖：细胞因子、生长因子、营养物质的影响。

- 细胞毒性与凋亡：评估毒性化合物、抗癌抗体、毒素、环境污染物等。

- 药物发现：抗癌药物的高通量筛选。

储存条件：试剂盒在室温下运输。CellQuanti-Blue 试剂对光敏感，应存放在提供的棕色瓶中，于4°C保存。对照试剂在-20°C下稳定。保质期：收到后12个月。

注意事项：试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参考材料安全数据表以获取详细信息。

实验步骤：

CellQuanti-Blue 实验基于代谢活跃的细胞将非荧光试剂转化为荧光产物。对于大多数细胞，这种还原反应需要1到5小时。然后在荧光微孔板读数器上定量产物的荧光强度。尽管大多数培养基中含有酚红，但酚红不会干扰该实验。技术说明中的所有数据均在含有酚红的培养基中获得。

一般注意事项：

- 孵育时间：孵育时间取决于细胞系。某些细胞系表现出较强的代谢活性，因此比代谢活性较低的细胞系需要更短的孵育时间。可以通过多次读取平板（例如，在加入CellQuanti-Blue 试剂后每30分钟读取一次）来轻松确定孵育时间。一般来说，孵育1到5小时是足够的。长时间孵育（如超过18小时）可能导致高细胞数量时荧光响应非线性。

- 细胞数量：通常优化后的CellQuanti-Blue 试剂对培养细胞数量表现出较宽范围的线性荧光响应。建议通过细胞稀释法确定每孔细胞数量，以获得最高的信噪比。可以通过细胞稀释法轻松确定最佳细胞数量。

- 对照组：虽然不是必需的，但可以运行一种细胞毒性或促进细胞增殖的阳性对照。皂甙是一种细胞毒性洗涤剂，可从BioAssay Systems获得（见技术说明中的图2）。每次实验应进行空白对照，即不含细胞的培养基或含有0.1%皂甙的细胞。空白对照用于确定背景荧光，该值必须从数据分析中减去。

技术说明：

CellQuanti-Blue 实验试剂盒经过特别优化和配方调整，以提供一种灵敏、便捷且稳定的细胞增殖和细胞毒性检测实验。试剂盒的关键特点如下：

- 安全。非放射性实验（与H-胸苷掺入实验相比）。

- 灵敏且准确。低至100个细胞可以被准确定量。

- 节省时间。在96孔和384孔板中进行的高通量实验允许同时处理大量样本。

- 均相且便捷。单一试剂，“混合-孵育-测量”型实验。无需洗涤和试剂转移步骤。

- 稳定且适用于高通量筛选（HTS）。在96孔和384孔板中，Z'因子通常为0.6到0.9。可以轻松在HTS液体处理系统上自动化操作。

示例：

图1. CellQuanti-Blue 荧光与细胞数量的线性关系。HEK293细胞在384孔板中进行稀释，并用CellQuanti-Blue 试剂处理。荧光强度与细胞数量呈线性关系（R? = 0.999）。从空白对照中估算的检测限为100个细胞。

图2. HEK293细胞中皂甙的剂量依赖性细胞毒性。HEK293细胞以每孔15,000个细胞（40 ?L）的密度铺板。细胞用不同浓度的皂甙处理。过夜培养后，加入5 ?L CellQuanti-Blue 试剂（实心圆圈）。Alamar Blue（空心圆圈）也进行了对比测试。经过3小时孵育后，使用Molecular Devices LJL Analyst测量荧光强度。数据代表平均值 ± 标准差（n = 3）。皂甙的IC??值分别为：CellQuanti-Blue （信号：背景 = 4.8倍）为0.0016 wt%，Alamar Blue（信号：背景 = 3.3倍）为0.0017 wt%。

文献参考：

1. Kelley, KD et al (2010). YPEL3, a p53-regulated gene that induces cellular senescence. Cancer Res. 70(9):3566-75.

2. Wang T, et al (2010). Activated T-cells inhibit neurogenesis by releasing granzyme B: rescue by Kv1.3 blockers. J Neurosci. 30(14):5020-7.

3. Heminger K, et al (2009). Alterations in gene expression and sensitivity to genotoxic stress following HdmX or Hdm2 knockdown in human tumor cells harboring wild-type p53. Aging 1(1):89-108.

4. Desplats, PA et al (2008). Functional roles for the striatal-enriched transcription factor, Bcl11b, in the control of striatal gene expression and transcriptional dysregulation in Huntington's disease. Neurobiol Dis.31(3):298-308. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。