BioAssay Systems 孔雀石绿磷酸盐测定试剂盒-- 试剂非常稳定，不会沉淀

碧绿色孔雀石磷酸盐检测试剂盒是基于碧绿色孔雀石、钼酸盐和游离磷酸根之间形成的绿色复合物来进行定量的。该反应快速生成的颜色可以在分光光度计（600 - 660 nm）或酶标仪上方便地测量。这些非放射性比色试剂盒经过优化，提供了卓越的灵敏度和延长的保质期。该检测方法简单快捷，仅需一个添加步骤即可进行磷酸盐测定。检测可以在试管、比色皿或多孔板中进行。检测可以在 96 孔和 384 孔板中方便地进行，适用于高通量筛选酶抑制剂。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品孔雀石绿磷酸盐测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点：

- 试剂非常稳定：由于我们创新的配方，试剂不会沉淀。因此，在检测前不需要过滤试剂，这通常是其他商业试剂盒所要求的。

- 高灵敏度和宽检测范围：能够检测到低至 1 皮摩尔的磷酸盐，有效范围在 0.02 uM 至 40 uM 磷酸盐之间。

- 快速且方便：均相“混合即测”检测法可在 20 分钟内定量游离磷酸盐。

- 兼容常规实验室和高通量筛选（HTS）格式：检测可以在试管、比色皿或微孔板中进行，使用分光光度计和酶标仪。

- 稳健且适合 HTS：在 96 孔和 384 孔板中观察到的 Z' 因子为 0.7 至 0.9。可以在 HTS 液体处理系统上轻松自动化。

应用：

- 磷酸酶检测：从肽、蛋白质或小分子底物中释放磷酸盐。

- 脂肪酶检测：从磷脂中释放磷酸盐。

- 核苷三磷酸酶检测：从核苷三磷酸（ATP、GTP、TTP、CTP 等）中释放磷酸盐。

- 定量磷脂、蛋白质和 DNA 等中的磷酸盐。

- 药物发现：高通量筛选磷酸酶抑制剂。

试剂盒内容：96 孔板进行 2,500 次检测

- 试剂 A：50 mL

- 试剂 B：1 mL

- 标准品：1 mL（1 mM 磷酸盐）

储存条件： 该试剂盒在常温下运输。当在 4°C 下储存时，试剂和标准品稳定期为一年。

注意事项： 试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。详细信息请参阅材料安全数据表。

使用 96 孔板的操作流程：

- 试剂准备：每次检测需要 20 uL 工作试剂。通过将 100 体积的试剂 A 和 1 体积的试剂 B 混合来准备足够量的工作试剂（例如，5 mL 试剂 A 和 50 uL 试剂 B）。工作试剂在室温下至少稳定一天。

- 重要提示：在使用前，试剂必须恢复至室温。在每次检测前，重要的是要检查所有酶制剂和检测缓冲液中不含游离磷酸盐。可以通过将 20 uL 工作试剂加入 80 uL 样本溶液中来方便地进行此操作。在 620 nm 处的空白 OD 值应低于 0.2。如果 OD 读数高于 0.2，则检查水中的磷酸盐水平。双蒸馏水的 OD 读数通常低于 0.1。实验室洗涤剂可能含有高水平的磷酸盐。确保实验室器具在彻底清洗后没有磷酸盐污染。

1. 磷酸盐标准品的准备：通过将 40 uL 1 mM 磷酸盐标准品移入 960 uL 蒸馏水或酶反应缓冲液中，制备含有 40 uM 磷酸盐的预混溶液。对试管进行编号。按照下表所示稀释标准品。将 80 uL 标准品双份移入透明底部 96 孔板的孔中。添加仅含水或反应缓冲液的空白对照。

2. 将 80 uL 待测样品移入板的单独孔中。

- 注意：对于酶反应，可以通过添加特定抑制剂来终止反应，或者可以直接通过添加工作试剂来停止反应。在检测前可能需要稀释反应混合物（见一般注意事项）。对于 ATP 酶或 GTP 酶检测，ATP 或 GTP 的浓度应低于 0.25 mM。如果反应混合物中 ATP 或 GTP 的浓度 > 0.25 mM，则需要用蒸馏水稀释样品。例如，如果 ATP 酶反应中 ATP 的浓度为 1 mM，在反应结束后，需将反应混合物用水稀释 4 倍后再进行检测。

3. 向每个孔中加入 20 uL 工作试剂。轻轻敲击板子使其混合均匀。

4. 在室温下孵育 30 分钟以显色。

5. 在酶标仪上测量 600 nm - 660 nm（620 nm）处的吸光度。

- 对于 384 孔板的检测，操作步骤相同，只是标准品和样品溶液的体积应为 40 uL，工作试剂的体积应为 10 uL。

示例：

图表：96 孔板中的磷酸盐标准曲线。孵育 30 分钟后，读取 620 nm 处的吸光度。数据以平均值 ± 标准差（n = 2）表示。有效检测范围为 0.02 - 40 uM 磷酸盐。

文献：

1. Lee, JS et al (2020). Host surface ectonucleotidase-CD73 and the opportunistic pathogen, Porphyromonas gingivalis, cross-modulation underlies a new homeostatic mechanism for chronic bacterial survival in human epithelial cells. Virulence, 11(1), 414-429.

2. Dangi, P et al (2019). Natural product inspired novel indole based chiral scaffold kills human malaria parasites via ionic imbalance mediated cell death. Scientific Reports, 9(1), 17785.

3. Wang, X et al (2020). The antitumor agent ansamitocin p-3 binds to cell division protein ftsz in actinosynnema pretiosum. Biomolecules, 10(5). 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。