琥珀酸(或称琥珀酸)存在于所有植物和动物组织中。它是柠檬酸循环的中间产物,在细胞内能量生成中发挥着重要作用。由于其低毒性,琥珀酸被广泛用作食品、饮料和制药行业的调味剂。
BioAssay Systems的琥珀酸测定试剂盒提供了一种简单、一步的测定方法,用于测量琥珀酸。在此测定中,琥珀酸被转化为丙酮酸,后者与特定试剂和染料反应形成有色产物。反应产物在570纳米处的吸光度或在λex/em = 530/585纳米处的荧光强度与样本中的琥珀酸浓度成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyChrom 琥珀酸盐测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
EnzyChrom 琥珀酸盐测定试剂盒 | BAS-ESNT-100 | 查看 |
主要特点
快速且灵敏。使用20微升样本。线性检测范围:比色法为10微摩尔到400微摩尔,荧光法为2到40微摩尔。
方便。操作过程包括加入单一工作试剂,并在30分钟后读取吸光度或荧光。室温测定,无需37摄氏度加热器。
高通量。可以轻松自动化为高通量96孔板测定方法,每天可处理数千个样本。
应用
直接测定:食品、饮料、农产品和其他生物样本中的琥珀酸。
试剂盒组成(96孔板,100次检测)
检测缓冲液:10毫升
酶混合物:120微升
辅酶:120微升
磷酸烯醇式丙酮酸(PEP):干粉
染料试剂:120微升
标准品:500微升,20毫摩尔琥珀酸
储存条件
试剂盒在冰上运输。收到后将所有组分储存于-20摄氏度。保质期:收到后6个月。
注意事项
试剂仅用于研究。打开前短暂离心管。在测定前将所有组分平衡至室温。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参考材料安全数据表以获取详细信息。
操作步骤
试剂准备:向PEP管中加入120微升水以复溶。通过反复吸吹确保PEP完全溶解。将复溶后的PEP储存于-20摄氏度,并在1个月内使用。
样本准备:清澈且略带颜色的样本可以直接测定。建议测试几种稀释度以确定最佳稀释因子n。固体样本(食品、水果等)可在水中均质化,随后过滤或离心(例如5分钟,14000转/分钟)。检测样本:酱油和红酒。每种样本在比色分析时用去离子水稀释1:30到1:50,或在荧光分析时稀释1:300到1:500。所有样本可在-80到-20摄氏度下至少储存一个月。
比色法操作步骤
1. 比色法测定需要内标。每个样本需要两个单独的反应:1)样本加内标;2)单独的样本。此外,每个测定板需要一个水空白孔。将每个样本的20微升分别加入两个不同的孔中。另外,在一个单独的孔中加入20微升去离子水。对于内标,将20微升20毫摩尔的标准品与380微升去离子水混合,制备400微升1毫摩尔的琥珀酸标准溶液。向样本加内标的孔中加入5微升1毫摩尔的标准溶液。向单独的样本孔和水孔中加入5微升去离子水。
2. 通过混合以下试剂为每个孔准备足够量的工作试剂(WR):85微升检测缓冲液、1微升酶混合物、1微升辅酶、1微升PEP和1微升染料试剂。建议新鲜配制WR。向每个孔中加入80微升WR。轻拍板子以混合均匀。在室温下孵育30分钟。
3. 在570纳米(550-585纳米)处读取吸光度。
文献参考:
1. Serena, C. et al (2018). Elevated circulating levels of succinate in human obesity are linked to specific gut microbiota. The ISME journal,12(7), 1642.
2. Astiarraga, B et al (2020). Impaired succinate response to a mixed meal in obesity and type 2 diabetes is normalized after metabolic surgery. Diabetes Care, 43(10), 2581-2587.
3. Ceperuelo-Mallafre, V et al (2019). Preoperative circulating succinate levels as a biomarker for diabetes remission after bariatric surgery.Diabetes Care, 42(10), 1956-1965.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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