BioAssay Systems EnzyFluo 人SHP2(Y542)磷酸化酶联免疫吸附试剂盒，细胞直接在96孔板中培养，无需细胞裂解

蛋白质磷酸化在调节细胞内蛋白质活性方面发挥着关键作用。已知大量的蛋白激酶和磷酸酶参与多种信号转导通路。在生命科学研究和药物发现中，能够监测这些信号转导通路、目标蛋白磷酸化状态以及药物效应的快速检测方法是非常理想的。

含有Src同源区2结构域的磷酸酶-2（SHP2，或SHPTP2、PTPN11、PTP2C）是一种广泛表达的蛋白酪氨酸磷酸酶，在有丝分裂激活、代谢控制、转录调控和细胞迁移中发挥着调控作用。BioAssay Systems的SHP2（Y542）磷酸化ELISA试剂盒提供了一种快速、灵敏的检测方法，用于测量人细胞中的磷酸化蛋白pSHP2（Y542），并将磷酸化水平与同一孔中的总蛋白含量进行标准化。这种简单高效的检测方法无需细胞裂解液制备，可用于研究潜在的信号通路以及抑制剂、siRNA或激活剂对通路的影响。在该检测中，96孔板中培养的细胞经过固定和通透处理。使用特异性一抗检测SHP2（Y542）的磷酸化，随后使用辣根过氧化物酶（HRP）偶联的二抗和荧光底物，以及一种测量同一孔中总蛋白的荧光试剂。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyFluo 人SHP2(Y542)磷酸化酶联免疫吸附试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

新型且改进。总检测时间从标准的21小时缩短至6.5小时（手工操作时间2.5小时）。

简单便捷。细胞直接在96孔板中培养，无需细胞裂解。

准确且高通量。在同一孔中将蛋白磷酸化水平与细胞总蛋白进行标准化，极大地减少了孔间差异。可以轻松自动化为高通量96孔板检测方法，每天可检测数千个样本。

应用

检测完整细胞中SHP2（Y542）的磷酸化状态。

评估激活剂、抑制剂、siRNA等对通路的调节作用。

已测试物种：人（未测试其他物种）。

试剂盒组成

洗涤缓冲液原液：25毫升

封闭缓冲液：25毫升

蛋白染色液：6毫升

染料试剂：120微升

Ab1：10微升

Ab2（gM-HRP）：10微升

储存条件

试剂盒在冰上运输。收到后，将所有试剂储存于-20摄氏度。这些试剂的保质期约为收到后6个月。

注意事项

试剂仅用于研究。使用这些试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参考材料安全数据表以获取详细信息。

NIH 3T3细胞中SHP2（Y542）磷酸化的诱导

将3×10⁴个NIH 3T3细胞接种于100微升培养基中，放入96孔板。在37摄氏度下过夜培养后，用50纳克/毫升的PDGFbb在无血清培养基中处理细胞。使用ESHP2-100试剂盒检测SHP2（Y542）的磷酸化。

文献参考：

1. Cohen, P. (2002). The origins of protein phosphorylation. Nature Cell Biology. 4 (5): E127–130.

2. Smoly, I. et al (2017). An asymmetrically balanced organization of kinases versus phosphatases across Eukaryotes determines their distinct impacts". PLOS Computational Biology. 13 (1): e1005221.

3. Vlastaridis, P. et al (2017). Estimating the total number of phosphoproteins and phosphorylation sites in eukaryotic proteomes.GigaScience. 6 (2): 1–11 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。