磷脂酶D(PLD)催化甘油磷脂的磷酸二酯键的水解,生成磷脂酸和一个自由头基团。PLD表达的异常与人类癌症有关。BioAssay Systems的方法提供了一种简单且高通量的检测方法,用于测量PLD活性。在此检测中,PLD水解磷脂酰胆碱生成胆碱,随后利用胆碱氧化酶和一种特异性过氧化氢酶染料进行测定。在570纳米处的粉红色产物的光密度或荧光强度(530/585纳米)与样本中的PLD活性成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyChrom 磷脂酶d测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
EnzyChrom 磷脂酶d测定试剂盒 | BAS-EPPD-100 | 查看 |
主要特点
灵敏:使用10微升样本。检测范围:比色法检测为0.06至10 U/L,荧光法检测为0.04至1 U/L。
简单且高通量:检测过程只需加入单一工作试剂,可轻松适应高通量检测,用于药物筛选。
应用
直接检测:用于生物样本中的磷脂酶D检测。
药物发现/药理学:研究药物对磷脂酶D代谢的影响。
试剂盒组成
检测缓冲液:10毫升
染料试剂:120微升
酶混合物:干粉
底物:1.5毫升
校准液:400微升
储存条件
试剂盒在运输过程中使用冰块包装。收到后,所有组分应储存在-20℃。保质期为收到后六个月。
注意事项
试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
比色法检测
液体样本可以直接检测。固体样本应在检测前在合适的酶缓冲液中匀浆。
注意:含有巯基的试剂(例如β-巯基乙醇、二硫苏糖醇,浓度>5微摩尔)、叠氮化钠、EDTA和十二烷基硫酸钠已知会干扰此检测,应在样本制备中避免使用。如果样本已知含有胆碱,应通过透析或膜过滤将其去除。
所需材料(但未提供)
移液装置、离心管、透明平底未涂层96孔板、光密度板读取器;黑色平底未涂层96孔板、荧光板读取器。
文献参考:
1. Su W, Chen Q, Frohman MA. (2009). Targeting phospholipase D with small-molecule inhibitors as a potential therapeutic approach for cancer metastasis. Future Oncol. 5(9):1477-86.
2. Carman GM, Fischl AS, Dougherty M, Maerker G. (1981). A spectrophotometric method for the assay of phospholipase D activity. Anal Biochem. 110(1):73-6.
3. Imamura S, Horiuti Y. (1978). Enzymatic determination of phospholipase D activity with choline oxidase. J Biochem. 83(3):677-80.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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