乙酸是一种常见的阴离子,对所有生命形式都至关重要。当它与辅酶A结合时,它是碳水化合物和脂肪代谢的核心。其酸性形式——醋酸,由醋酸菌(如醋酸杆菌属和梭菌属的丙酮丁醇梭菌)产生并排出,这些细菌广泛存在于食品、水和土壤中。醋酸也是人类和其他灵长类动物阴道润滑液的成分之一,在其中似乎起到温和的抗菌作用。醋酸是醋的主要成分,广泛应用于食品、染料、涂料、胶水和合成纤维中。
BioAssay Systems的检测方法利用酶耦联反应生成有色、荧光产物。在570纳米处的吸光度或在530/585纳米处的荧光强度与样品中乙酸的浓度成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyChrom 乙酸乙酯测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
EnzyChrom 乙酸乙酯测定试剂盒 | BAS-EOAC-100 | 查看 |
主要特点
样品用量少,仅需10微升。比色法检测范围为0.20至20毫摩尔/升乙酸,荧光法检测范围为0.13至2毫摩尔/升乙酸。
应用
直接检测:用于生物样本(如血清/血浆)、食品、农业和环境样本中的乙酸。
药物发现/药理学:研究药物对乙酸代谢的影响。
试剂盒组成
检测缓冲液:25毫升
酶A:干粉
显色剂:1毫升
酶B:干粉
染料试剂:120微升
标准品:1毫升
ATP:120微升
储存条件
试剂盒在运输过程中使用冰块包装。收到后,所有组分应储存在-20℃。保质期为收到后六个月。
注意事项
试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
荧光法操作步骤
样品处理
血清和血浆样本可以直接检测。含有醋酸的样本(如醋)应在检测前用检测缓冲液稀释。样品应清澈,不含沉淀物或颗粒。如果存在沉淀物或颗粒,应通过过滤或离心去除。
1. 平衡温度:将所有组分平衡至室温。短暂离心试管。用600微升显色剂复溶酶A,用120微升检测缓冲液复溶酶B。在进行检测之前,确保两种酶都完全溶解。在实验过程中,应将酶保存在冰箱或冰上。如果储存在-20℃,复溶后的酶A和酶B可稳定保存四周。
2. 标准品和样品:通过将4微升200毫摩尔/升标准品与396微升去离子水混合,制备400微升2毫摩尔/升标准品。
3. 反应:通过将90微升检测缓冲液、5微升酶A、1微升酶B、1微升染料试剂和1微升ATP混合,为每个反应孔制备工作试剂。注意:工作试剂应新鲜配制,并在20分钟内使用。将90微升工作试剂转移到每个孔中。立即混合,并在室温下孵育30分钟。在530/585纳米处读取荧光强度。
文献参考:
1. Cuervo-Soto, LI et al (2015). Identification of a novel carbohydrate esterase from Bjerkandera adusta: Structural and function predictions through bioinformatics analysis and molecular modeling. Proteins:Structure, Function, and Bioinformatics 83(3): 533-546.
2. Inagaki, T., & Matsuura, K. (2018). Extended mutualism between termites and gut microbes: nutritional symbionts contribute to nest hygiene.The Science of Nature, 105(9-10), 52.
3. Balmer, M. L.,et al (2020). Memory cd8+ t cells balance pro- and antiinflammatory activity by reprogramming cellular acetate handling at sites of infection. Cell Metabolism, 32(3), 457-467.e5.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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