BioAssay Systems EnzyChrom 苹果酸脱氢酶测定试剂盒，方便且适用于高通量检测

苹果酸脱氢酶（MDH）（EC 1.1.1.37）是一种酶，能够在NAD存在的条件下可逆地催化L-苹果酸氧化为草酰乙酸。 在真核细胞中存在两种同工酶：MDH1和MDH2。MDH1存在于细胞质中，在将苹果酸转运至线粒体的苹果酸-天冬氨酸穿梭过程中发挥关键作用。MDH2是一种线粒体酶，参与三羧酸循环，可逆地将L-苹果酸转化为草酰乙酸。在一些神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）中，MDH活性较高。

BioAssay Systems的非放射性、比色法MDH检测试剂盒基于NADH偶联的酶促反应，将四氮唑盐MTT还原为在565纳米处具有最大吸收峰的还原型MTT。 565纳米处吸光度的增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品EnzyChrom 苹果酸脱氢酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

快速且灵敏。线性检测范围（20微升样品）：在37摄氏度下反应20分钟，检测范围为0.5至65 U/L。

方便且适用于高通量检测。均质“混合-孵育-测量”型检测。可轻松在高通量筛选液体处理系统上自动化操作，每天可处理数千个样品。

应用

生物样本（如血浆、血清、红细胞、组织和培养基）中MDH活性的测定。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）

检测试剂缓冲液：10毫升

酶A：120微升

NAD/MTT：1毫升

酶B：120微升

底物：600微升

校准液：1.5毫升

储存条件

试剂盒在运输过程中使用冰块包装。收到后，所有组分应储存于-20摄氏度。保质期：收到后6个月。

注意事项

试剂仅用于研究。使用试剂时应遵循实验室试剂的一般安全措施。详细信息请参阅材料安全数据表。

操作步骤

本检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，向样品中加入工作试剂时应迅速，混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。可在任何期望的温度（如25摄氏度或37摄氏度）下进行检测。

样品准备

血清和血浆可直接检测。

组织：在解剖前，用磷酸盐缓冲液（pH 7.4）冲洗组织以去除血液。将组织（50毫克）在约200微升冷的50毫摩尔/升磷酸钾缓冲液（pH 7.5）中匀浆。在4摄氏度下以14000×g离心10分钟。取上清液进行检测。

细胞裂解液：通过在4摄氏度下以2000×g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞，不要使用蛋白酶收获细胞；而是使用橡胶刮刀。在含有50毫摩尔/升磷酸钾（pH 7.5）的冷缓冲液中适当体积中匀浆或超声细胞。在4摄氏度下以14000×g离心10分钟。取上清液进行检测。

所有样品可在-20至-80摄氏度下至少保存一个月。

试剂准备

将试剂平衡至期望的反应温度（建议37摄氏度）。使用前短暂离心试管。

文献参考：

1. Venkat, S. et al (2017). Genetically encoding thioacetyl-lysine as a non-deacetylatable analog of lysine acetylation in Escherichia coli.FEBS open bio, 7(11), 1805-1814.

2. Gan, Q et al (2016). Expanding the genetic code of Salmonella with noncanonical amino acids. Sci Rep 6, 39920.

3. Trivedi, AK et al (2015). Adaptation of oxidative phosphorylation to photoperiod-induced seasonal metabolic states in migratory songbirds.Comp. Biochem. Physiol. A 184: 34-40. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。