BioAssay Systems【干冰】EnzyFluo 葡萄糖摄取测定试剂盒解决方案

葡萄糖摄取有多种方法和转运蛋白，取决于细胞类型的代谢需求以及葡萄糖的可用性。有超过十种不同的易化扩散葡萄糖转运蛋白，它们可以在不消耗ATP的情况下，将葡萄糖沿着浓度梯度运输。在肾脏中，次级主动运输被用于逆浓度梯度摄取葡萄糖，以确保尿液中几乎不排出葡萄糖。

BioAssaySystems的荧光细胞基础葡萄糖摄取测定法使用2-脱氧葡萄糖（2-DG），这是一种广泛使用的葡萄糖类似物，因为它可以被葡萄糖转运蛋白摄取，并被内源性己糖激酶代谢为2-脱氧葡萄糖-6-磷酸（2-DG6P）。2-DG6P会在细胞内积累，因为它不是磷酸葡萄糖异构酶（糖酵解的下一步）的合适底物。细胞被裂解后，加入过量的NADP和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH），以代谢2-DG6P并生成等摩尔量的NADPH。然后通过G6PDH循环反应测量NADPH，以放大信号并产生可测量的荧光信号，激发波长/发射波长为530/585nm，与2-DG6P的浓度成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品【干冰】EnzyFluo 葡萄糖摄取测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

-安全。不使用放射性物质。

-灵敏且准确。检测限为0.1uM，线性范围可达5uM2-DG6P。

-简单便捷。可作为中通量细胞葡萄糖转运测定法实现自动化。

应用

-测定完整细胞中的葡萄糖摄取。

-评估配体或药物对葡萄糖转运的影响。

试剂盒组成

-测定缓冲液：10mL

-G6P试剂：1.5mL

-酶A：120uL

-酶B：120uL

-2-DG底物：1.2mL

-NADP：120uL

-2-DG6P标准品：120uL

-探针：750uL

-NADP/NADPH提取缓冲液：各12mL

储存条件

-将所有试剂储存于-20°C。自收到之日起有效期为6个月。

注意事项

-试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规安全措施。详细信息请参阅材料安全数据表。

PANC-1细胞中的葡萄糖转运测定实验

细胞按照协议进行接种、饥饿和处理。左侧：在有无1mM苯甲酸的存在下，PANC-1细胞的梯度实验。右侧：苯甲酸对葡萄糖转运的抑制曲线。PANC-1细胞以每孔10,000个细胞的密度进行接种。

文献参考：

1. Liu, Meihan, et al (2019). Activation of AMPK by metformin promotes renal cancer cell proliferation under glucose deprivation through its interaction with PKM2. International Journal of Biological Sciences 15.3:617-627.

2. Park, Seong-Hoon, et al(2016). SIRT2-mediated deacetylation and tetramerization of pyruvate kinase directs glycolysis and tumor growth.Cancer research 76.13: 3802-3812.

3. Tunduguru, Ragadeepthi (2016). Regulation of skeletal muscle insulin sensitivity by PAK1. Dissertation. Assay: Glucose uptake in rat cells. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。