谷胱甘肽还原酶(GR)可以将氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原为还原型谷胱甘肽(GSH),而GSH是一种重要的细胞抗氧化剂。较高的GSH/GSSG比值对于抵抗氧化应激至关重要。因此,检测谷胱甘肽还原酶(GR)的活性被用作氧化应激的指标。BioAssaySystems的非放射性、比色法GR检测试剂盒旨在通过Ellman法准确测量生物样本中的GR活性。该方法中,样本中的GR将GSSG还原生成的GSH与DTNB反应,形成黄色产物(TNB??)。在412nm处测量的吸光度变化速率与样本中的GR活性成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品【干冰】EnzyChrom谷胱甘肽还原酶试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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【干冰】EnzyChrom谷胱甘肽还原酶试剂盒 | BAS-ECGR-100 | 查看 |
主要特点
-快速且灵敏。线性检测范围(20uL样本):20分钟反应时间为0.4到50U/L,检测下限为0.4U/L。
-便捷且高通量。均相“混合-孵育-测量”型检测方法。可轻松在高通量筛选(HTS)液体处理系统上自动化操作,每天可处理数千个样本。
应用
-测定生物样本(如血浆、血清、组织和培养基)中的GR活性。
试剂盒组成(96孔板,100次检测)
-检测缓冲液:10mL
-GDH:120uL
-底物:1mL
-DTNB:60uL
-辅酶:1mL
-校准液:1.5mL
储存条件:试剂盒在运输过程中使用冰袋冷藏。收到后,请将所有组分储存于-20°C。有效期:自收到之日起6个月。
注意事项:试剂仅供研究使用。使用试剂时,请遵循实验室试剂的常规操作注意事项。详细信息请参考材料安全数据表。
样本准备
-血清和血浆:可直接检测。
-组织:在解剖前,用磷酸盐缓冲液(pH7.4)冲洗组织以去除血液。将组织(50mg)在含有50mM磷酸钾(pH7.5)的缓冲液中匀浆。在4°C下以10,000×g离心15分钟,取上清液进行检测。
-细胞裂解液:通过在4°C下以2,000×g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞,不要使用蛋白酶酶收获细胞,而是使用橡胶刮刀。在含有50mM磷酸钾(pH7.5)的冷缓冲液中适当体积中匀浆或超声处理细胞。在4°C下以10,000×g离心15分钟,取上清液进行检测。
-所有样本均可在-20到-80°C下保存至少一个月。
校准液准备:将100uL校准液和100uL检测缓冲液分别加入96孔板的不同孔中。
试剂准备:将试剂平衡至所需的反应温度(例如25°C或37°C)。使用前短暂离心试剂管。为所有样本准备足够的工作试剂(WR),对于每个96孔检测:将8uL底物……
文献参考:
1. Delides, A et. al. (1976). An optimized semi-automatic rate method for serum glutathione reductase activity and its application to patients with malignant disease. J. Clin. Path. 29: 73-7.
2. Smith, IK et. Al. (1988) Assay of glutathione reductase in crude tissue homogenates using 5,5′-dithiobis(2-nitrobenzoic acid). Anal. Biochem.175: 408-13.
3. Cribb, AR et. Al. (1989) Use of a microplate reader in an assay of glutathione reductase using 5,5′-dithiobis(2-nitrobenzoic acid). Anal.Biochem. 183: 195-6.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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