过氧化氢酶(Catalase,EC1.11.1.6)是一种广泛存在的抗氧化酶,能够催化过氧化氢(H2O2)分解为水和氧气。通过防止过氧化氢的过度积累,过氧化氢酶使得产生H?O?作为副产物的重要细胞过程能够安全进行。过氧化氢酶活性的缺乏与灰发和过氧化物酶体疾病无过氧化氢酶症(acatalasia)有关。用于测定过氧化氢酶活性的简单、直接且高通量的检测方法具有广泛的应用。BioAssaySystems改进的检测方法直接测量过氧化氢酶对H2O2的降解,使用一种氧化还原染料。在570nm处的吸光强度变化或荧光强度变化(λem/ex=585/530nm)与样本中的过氧化氢酶活性成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品【干冰】EnzyChrom 过氧化氢酶检测试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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【干冰】EnzyChrom 过氧化氢酶检测试剂盒 | BAS-ECAT-100 | 查看 |
主要特点
-灵敏且准确。使用10uL样本。线性检测范围:比色法为0.2-5U/L,荧光法为0.02-0.5U/L。
-简单便捷。操作过程包括向样本中加入底物,孵育30分钟,随后加入检测试剂并读取吸光度或荧光强度。
应用
-直接检测:适用于生物样本(如血清、血浆、尿液、唾液、细胞培养等)中的过氧化氢酶活性。
-药物发现/药理学:研究药物对过氧化氢酶活性的影响。
试剂盒组成
-检测缓冲液:25mL
-HRP酶:120uL
-染料试剂:120uL
-H2O2溶液:100uL(3%H2O2)
-阳性对照:8uL过氧化氢酶
储存条件
试剂盒在运输过程中使用冰块冷藏。收到后,所有组分应储存于-20°C。有效期为6个月。
注意事项
-试剂仅供研究使用。在使用试剂时,应遵循实验室试剂的常规安全措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
样本准备
-组织(10mg)和细胞(10?)在200uL冰冷的PBS中匀浆。以14000rpm离心10分钟以去除杂质。使用上清液进行检测。
-注意:含有巯基(-SH)的试剂(例如β-巯基乙醇、二硫苏糖醇)已知会干扰此检测,应在样本中保持低于10uM的浓度。
计算
-从标准值中减去空白值(#4),并绘制?OD(吸光度差)或?F(荧光强度差)与标准浓度的关系图。确定斜率,并计算样本的过氧化氢酶活性。
-RSAMPLEBlank和RSAMPLE分别是样本空白和样本的吸光度或荧光强度读数。斜率从标准曲线中确定。30分钟是过氧化氢酶反应时间。n是样本的稀释倍数。
-单位定义:1个单位是指在pH7.0和室温下,每分钟分解1微摩尔H2O2的过氧化氢酶的量。
文献参考:
1. Pradhan, Arnab, et al (2017). Elevated catalase expression in a fungal pathogen is a double-edged sword of iron. PLoS pathogens
13.5: e1006405.
2. AlAsmari, A. F.,et al (2020). Elucidation of the molecular mechanisms underlying sorafenib-induced Hepatotoxicity. Oxidative
Medicine and Cellular Longevity, 2020, 1-10
3. Sahin, T. D., et al. (2020). Infliximab prevents dysfunction of the vas deferens by suppressing inflammation and oxidative stress in rats with chronic stress. Life Sciences, 250, 117545.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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