天冬氨酸(Aspartate)是一种非必需氨基酸,是其他几种氨基酸的前体,并且是一种兴奋性神经递质。天冬氨酸参与尿素循环和糖异生。BioAssay Systems的天冬氨酸检测试剂盒提供了一种简单、直接且适合自动化的程序,用于测定天冬氨酸浓度。天冬氨酸被转化为丙酮酸,随后丙酮酸被氧化,同时染料被转化为有色且具有荧光的形式。氧化后的染料在570nm处的吸光强度或在λex/em = 530/585nm处的荧光强度与样本中的天冬氨酸浓度成正比。
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【干冰】EnzyChrom Aspartate 测试套件 | BAS-EASP-100 | 查看 |
主要特点:
灵敏且准确。线性检测范围:比色法检测为2至400uM天冬氨酸,荧光法检测为1至50uM天冬氨酸。
应用:
直接检测:适用于血浆、血清、组织和培养基中的天冬氨酸。
药物发现/药理学:研究药物对天冬氨酸代谢的影响。
试剂盒组成(96孔板,100次检测)
显色剂:10mL
天冬氨酸转氨酶(AST Enzyme):240uL
染料试剂:120uL
辅酶:600uL
丙酮酸脱羧酶(ODC Enzyme):120uL
天冬氨酸标准品:400uL
储存条件:
试剂盒在运输过程中使用冰块冷藏。收到后,所有组分应储存于-20°C。有效期为六个月。
注意事项:
试剂仅供研究使用。在使用试剂时,应遵循实验室试剂的常规安全措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
操作步骤:
重要提示:将显色剂平衡至所需的检测温度。在37°C下进行检测需要30分钟,而在室温(25°C)下进行检测需要60分钟。
样本准备:
组织或细胞样本(2×106)可在100uL PBS中匀浆。以14000rpm离心5分钟。使用上清液进行检测。
血清和血浆样本应使用10kDa离心过滤器(例如Amicon Ultra-0.5)进行脱蛋白处理。此外,建议在血清和血浆样本中使用内标,并且由于天冬氨酸浓度较低,强烈推荐使用荧光法检测。如果计划检测培养基中的天冬氨酸,尽可能避免使用含有高浓度丙酮酸的培养基(例如DMEM、L-15、F12等)。
标准曲线
文献参考:
1. Baetz, AL. et al (1975). Developmental Changes of Free Amino Acids in Bovine Fetal Fluids with Gestational Age and the Interrelationships between the Amino Acid Concentrations in the Fluid Compartments.J.Reprod. Fert. 44:437-44.
2. Graham, LT and Aprison, MH (1966). Fluorometric determination of aspartate, glutamate, and γ-aminobutyrate in nerve tissue using enzymic method. Anal. Biochem.15: 487-97.
3. Parvin, R et al (1980). Convenient rapid determination of picomole amounts of oxaloacetate and aspartate. Anal. Biochem.104: 296-9.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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