尿素酶(酰胺水解酶,EC 3.5.1.5)是一种能够催化尿素水解为二氧化碳和氨的酶。
化学反应式为:
(NH?)?CO + H?O → CO? + 2NH?
许多胃肠道或泌尿道病原体会产生尿素酶。因此,其活性是检测如幽门螺杆菌等病原体存在与否的有用诊断参数。尿素酶存在于细菌、酵母和高等植物中。在牛瘤胃厌氧菌、人类粪便以及环境样本(如土壤和浮游植物)中,通常会测定尿素酶活性。
BioAssay Systems的尿素酶测定试剂盒提供了一种非常灵敏且便捷的手段,用于测定包括土壤在内的多种样本中的尿素酶活性。在该测定中,尿素酶与尿素发生反应,生成氨,氨的含量通过在670纳米处的伯特洛特法(Berthelot method)进行测定。该测定方法简单、灵敏、稳定,并且可以适应高通量检测。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品脲酶测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
脲酶测定试剂盒 | BAS-DURE-100 | 查看 |
脲酶测定试剂盒:
主要特点:
- 安全。非放射性测定法。
- 灵敏且准确。能够定量检测低至0.003 U/L的尿素酶活性。
- 均质且便捷。“混合-孵育-测量”型测定法。无需洗涤和试剂转移步骤。
- 稳健且适用于高通量筛选(HTS):可以轻松在高通量筛选液体处理系统上自动化操作,每天可处理数千个样本。
应用范围:
- 生物和环境样本中尿素酶活性的测定。
- 尿素酶抑制剂的评估和筛选。
试剂盒组成:
- 测定缓冲液:20毫升(pH 7.0)
- 试剂A:12毫升
- 尿素:1.5毫升
- 试剂B:6毫升
- 氯化铵:100微升(50毫摩尔/升)
储存条件:
- 试剂盒在室温下运输。收到后将所有试剂储存于4摄氏度。有效期为收到后6个月。
注意事项:
- 试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
一般注意事项:
1. 土壤和其他环境样本可以用测定缓冲液(10毫摩尔/升磷酸钠,pH 7.0)通过任何既定方法进行提取。对于这类低尿素酶活性样本,尿素酶反应孵育时间为2到4小时,温度为30摄氏度或37摄氏度(步骤2)。
土壤样本可能含有极低浓度的氨。为了校正样本中的氨,在检测前(步骤3),按照以下顺序混合制备样本空白:100微升试剂A、90微升样本提取液、10微升尿素和50微升试剂B。
2. 比色皿测定:将反应体系扩大4倍,总体积为1毫升,使用360微升样本、40微升尿素、400微升试剂A和200微升试剂B。
所需材料(但未提供):
- 移液装置、离心管、透明平底96孔板(例如Corning Costar)。
实验结果:
0.5克土壤样本在10毫升10毫摩尔/升磷酸钠(pH 7.0)中均质化(50克土壤/升)。通过14,000g离心5分钟获得含有尿素酶的澄清上清液。按照协议进行酶反应,孵育4小时,温度为30摄氏度。
反应结束后,测得铵浓度为29.4微摩尔/升,相当于尿素酶活性为29.4微摩尔/升÷240分钟=0.123 U/L,或29.4微摩尔/升÷(50克/升×4小时)=0.15微摩尔/克·小时。
文献参考:
1. Liu, Q. W. et al. (2018). Therapeutic efficiency of human amniotic epithelial stem cell-derived functional hepatocyte-like cells in mice with acute hepatic failure. Stem cell research & therapy, 9(1), 321.
2. Wu, D (2015). Constitutive expression of the DUR1, 2 gene in an industrial yeast strain to minimize ethyl carbamate production during Chinese rice wine fermentation. FEMS Microbiology Letters 363(1):fnv214.
3. Zhang, T. et al (2015). Development of an Agrobacterium-mediated transformation system for the cold-adapted fungi Pseudogymnoascus destructans and P. pannorum. Fungal Genetics and Biology 81: 73-81.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
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