氨(NH?)或其离子形式铵(NH??)是生物系统中重要的氮源,广泛存在于自然界中。简单、直接且易于自动化的测定NH?的方法非常受欢迎。BioAssay Systems的氨/铵测定试剂盒基于改进的邻苯二甲醛法。该试剂与氨/铵反应,生成荧光产物。荧光强度(激发波长/发射波长 = 360/450nm)与样本中的氨浓度成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品氨测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
氨测定试剂盒 | BAS-DNH3-200 | 查看 |
主要特点:
- 快速且灵敏。线性检测范围为0.012 - 1 mM氨。
- 便捷且高通量。均质“混合-孵育-测量”型测定。可在高通量筛选液体处理系统上自动化处理,每天可处理数千个样本。
应用领域:
- 生物样本(例如尿液)和环境样本中的氨/铵测定。
试剂盒组成:
- 测定缓冲液:20 mL
- 标准品:400 uL NH?Cl
- 试剂A:1 mL
- 试剂B:1 mL
储存条件:本产品在室温下运输。将试剂盒储存于-20°C。保质期:收货后12个月。
注意事项:试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
96孔板读取器测定操作步骤:
- 使用黑色平底96孔板。在测定前,将所有试剂平衡至室温。
- 注意:
1. 本测定与大多数去污剂、螯合剂和缓冲液组分兼容。如果可能,应避免使用蛋白质和含有伯胺的缓冲液(例如Tris、甘氨酸)。为了获得最佳结果,应在标准品和空白中加入与样本相同浓度的缓冲液。
2. 样本应清澈透明,不含任何颗粒或沉淀物。可以通过离心(14,000 rpm,5分钟)或过滤去除颗粒或沉淀物。
3. 尿液样本在测定前需用蒸馏水稀释50倍。
操作步骤:
1. 标准品。将10 uL 20 mM NH?Cl标准品与190 uL H?O混合,制备200 uL 1 mM标准品预混液。按以下方法稀释标准品。
2. 测定。为4个标准品和所有样本准备足够量的工作试剂。每个反应混合如下:90 uL测定缓冲液、4 uL试剂A和4 uL试剂B。向所有孔中加入90 uL试剂。立即轻敲板以混匀。在室温下黑暗中孵育15分钟。在酶标仪上测量360/450nm处的荧光强度。
手持式荧光光度计测定操作步骤(货号:FL360450):
1. 标准品。将5 uL提供的20 mM标准品与95 uL H?O或样本缓冲液混合,制备1 mM标准品。
2. 在单独的小玻璃管(货号:MGLTB100)中,分别加入10 uL H?O或样本缓冲液(空白)、10 uL 1 mM标准品和10 uL样本。然后向每个管中加入90 uL工作试剂(90 uL测定缓冲液、4 uL试剂A和4 uL试剂B)并混匀。在黑暗中孵育15分钟。
3. 打开读取器。为了校准读取器,将“空白”管放入样品架中。按下“校准”、“测定1”,然后“空白”。读取器开始测量。按下“←标→”,直到窗口显示“1.00”。将1 mM标准品放入样品架中。按下“测量”。读取器显示“校准完成”。按下“返回”。
4. 测量。将样本管放入样品架中。按下“测量”→“测定1”→“测量”。窗口中将显示氨浓度(mM)。记录数据,或按下“保存”以保存数据以便后续检索。按下“返回”,然后“测量”以测量下一个样本。
示例:
左图:在96孔板读取器(Spectramax M2)上进行的标准曲线;右图:在手持式荧光光度计(货号:FL360450)上获得的相关性图。
文献:
1. Gips CH, et al (1970). Preservation of urine for ammonia determination with a direct method. Clin Chim Acta. 29(3):501-5.
2. Beecher GR, Whitten BK (1970). Ammonia determination: reagent modification and interfering compounds. Anal Biochem. 36(1):243-6.
3. Rodger MR, Jenkins P (1984). Enzymic fluorometric assay of plasma ammonia with a centrifugal analyzer. Clin Chem. 30(10):1670-2.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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