BioAssay Systems 过氧化物分析试剂盒--简单且高通量

过氧化物（例如过氧化氢H?O?） 是在氧化应激条件下形成的关键活性氧种类之一。高水平的过氧化物生成与多种病理状况有关，例如衰老、哮喘、糖尿病、动脉粥样硬化、白内障、炎症性关节炎和神经退行性疾病。

简单、直接且易于自动化的过氧化物定量检测方法在研究和药物发现领域具有广泛的应用。BioAssay Systems的过氧化物检测试剂盒专为直接测定生物样本中的过氧化物浓度而设计，无需任何预处理。改进的方法利用了显色反应——Fe??-木偶橙反应，在该反应中，试剂中提供的Fe??被样本中的过氧化物氧化为Fe??，从而形成紫色复合物。在540 - 610 nm处测量的颜色强度是样本中过氧化物水平的准确指标。优化后的配方显著减少了原始样本中物质的干扰。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品过氧化物分析试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 灵敏且准确。使用山梨醇增强颜色强度。96孔板检测的检测范围为0.2 ?M（7 ng/mL）至30 ?M（1,020 ng/mL）H?O?。

- 简单且高通量。操作过程仅需加入一种检测试剂并孵育30分钟。可轻松自动化为96孔板的高通量检测方法，每天可检测数千个样本。

应用

- 直接检测：生物样本中的H?O?（例如血清、枸橼酸血浆、尿液、细胞裂解液、培养基）。

- 药理学：药物对过氧化物代谢的影响。

试剂盒组成（96孔板250次检测）

- 试剂A：1 mL

- 试剂B：50 mL

- 标准液：100 ?L 3%稳定化的H?O?

试剂盒在室温下运输。所有试剂储存于4°C。保质期：收货后12个月。

注意事项

试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

操作步骤

样本处理：某些化学物质已知会干扰检测，应在样本准备时避免使用。这些包括抗坏血酸、EDTA、肝素、丙酮酸钠（>1 mM）、DMSO（>0.02%）、NP-40（>0.6%）、SDS（>0.12%）、Tris（>8 mM）和乙醇（>0.4%）。样本可在采集后立即分析，或分装后储存于–20°C。避免反复冻融。

试剂准备：检测前将试剂平衡至室温。将1体积的试剂A与100体积的试剂B混合，配制足够的检测试剂。

96孔板操作步骤

1. 标准液制备：在检测当天新鲜配制标准液。将5 ?L 3% H?O?与495 ?L H?O混合于1.5 mL Eppendorf管中，充分混匀。将5 ?L该溶液与1465 ?L H?O混合。最终H?O?浓度为30 ?M（标记为“预混液”）。按照表中所示稀释标准液。

2. 将40 ?L稀释后的标准液和每个样本分别加入透明平底96孔板的不同孔中。向所有标准液和样本中加入200 ?L检测试剂。

3. 在室温下孵育30分钟，并在540 - 610 nm（峰值吸收在585 nm）处读取吸光度。

    - 注意：如果在极少数情况下，向样本中加入检测试剂后出现沉淀，将该样本孔中的全部反应混合物转移到1.5 mL Eppendorf管中，并在14,000转/分钟下离心2分钟。小心地将200 ?L上清液转移到干净的孔中，并读取吸光度。将吸光度读数乘以1.2以考虑体积变化。

计算

从标准液吸光度值中减去空白吸光度（水，#8），并绘制吸光度与H?O?浓度的关系图。从样本吸光度中减去空白吸光度。根据标准曲线确定样本中的过氧化物含量。

- 换算关系：1 ?M H?O?等于34 ng/mL或34 ppb。

所需材料（但未提供）

移液装置及配件、96孔板和板式读数仪。

实例

对山羊血清、人血清、293细胞培养基和新鲜人尿液进行双份检测，测得的过氧化物含量分别为8.7 ± 2.8、14.2 ± 2.7、2.4 ± 0.0和1.4 ± 0.6 ?M（n = 2）。

96孔板测定中的标准曲线

文献：

[1]. Zhang, Q., et al (2019). A Multifunctional Nanotherapy for Targeted Treatment of Colon Cancer by Simultaneously Regulating Tumor Microenvironment. THERANOSTICS, 9(13), 3732-3753.

[2]. Liu, Z.,et al (2021). ROS-responsive and multifunctional antiAlzheimer prodrugs: Tacrine-ibuprofen hybrids via a phenyl boronate linker. European Journal of Medicinal Chemistry, 212,112997.

[3]. Adhikari, B., et al (2020). Cold plasma seed priming modulates growth, redox homeostasis and stress response by inducing reactive species in tomato (Solanum lycopersicum). Free Radical Biology & Medicine, 156, 57-69. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。