BioAssay Systems 透明质酸酶抑制剂筛选试剂盒- 高通量筛选用于评估透明质酸酶抑制剂

透明质酸酶是一类能够催化糖胺聚糖透明质酸降解的酶。透明质酸是生物体细胞外基质的主要成分之一，它在细胞增殖和迁移中发挥重要作用。透明质酸酶在分解细胞增殖的关键因素——透明质酸中的作用，使其成为癌症治疗的潜在靶点。一种假设是，增加透明质酸酶的活性可能通过分解肿瘤扩张所需的细胞外基质来阻止肿瘤侵袭。相反，降低透明质酸酶活性可能通过阻止癌细胞从原发肿瘤中逃逸来防止转移。关于透明质酸酶在癌症病理学中确切作用的研究仍在进行中。

BioAssay Systems的透明质酸酶抑制剂筛选试剂盒采用两步比浊法反应，通过测量被水解的透明质酸的量来测定透明质酸酶的活性。一种终止试剂会停止酶促反应，并与孔中残留的透明质酸形成浊度。在600 nm处的浊度降低与样本中的透明质酸酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品透明质酸酶抑制剂筛选试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 快速可靠。整个检测可在30分钟内完成。

- 简单便捷。操作简单，仅涉及酶促反应和终止试剂的加入，无需洗涤或试剂转移步骤。

- 稳健且适用于高通量筛选。可在高通量筛选液体处理系统上轻松自动化，每天可处理数千个样本。

应用

- 高通量筛选用于评估透明质酸酶抑制剂。

试剂盒组成（96孔板100次检测）

- 底物：1.5 mL

- 终止试剂：20 mL

- 检测缓冲液：5 mL

- 酶缓冲液：5 mL

储存条件

试剂盒在室温下运输。收货后将试剂盒组件储存于-20°C。保质期：收货后12个月。

注意事项

试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

酶活性检测操作步骤

该检测基于酶催化的动力学反应。为确保相同的孵育时间，加入工作试剂的速度应快，混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。注意：试剂盒中未包含透明质酸酶或对照抑制剂。

试剂准备：检测前，将所有组件平衡至室温。工作试剂应新鲜配制，并在两小时内使用。

酶准备：透明质酸酶应在酶缓冲液中配制，并新鲜使用。白蛋白和其他蛋白质会干扰此检测，不应包含在酶缓冲液中。

以下协议针对人透明质酸酶（Acro Biosystems货号PH0-H5225）或牛透明质酸酶（Calzyme货号091A0300）进行了优化。如果使用不同物种或品牌的酶，我们建议您通过实验确定每孔使用的最佳酶量（请参阅网站上的产品常见问题解答以获取指导）。

将人透明质酸酶在酶缓冲液中稀释至20 U/mL。如果使用牛透明质酸酶，则在酶缓冲液中稀释至10 U/mL。

测试化合物准备：将测试化合物（即抑制剂）溶解在所选溶剂中。首先测试所选酶对溶剂的耐受性是明智的。在100 ?L酶促反应中，二甲基亚砜（DMSO）浓度为1%（体积比）或更低时不会干扰反应（20 ?L测试化合物可在5% DMSO中）。

所需材料（但未提供）

- 纯化的人透明质酸酶（例如Acro Biosystems货号PH0-H5225）或牛透明质酸酶（例如Calzyme货号091A0300），以及如果需要的话，一种对照透明质酸酶抑制剂（例如6-O-棕榈酰-L-抗坏血酸，TCI货号A0540）、移液装置、Eppendorf管、透明平底96孔板和板式读数仪。

示例：

6-O-棕榈酰-L-抗坏血酸滴定：重组人HAase与不同浓度的6-O-棕榈酰-L-抗坏血酸一起孵育酸。每种浓度的抑制剂均含有5v%的DMSO（最终1v%100uL酶反应）。

文献：

1. Lokeshwar, B., et al (2005). HYAL1 Hyaluronidase in Prostate Cancer:A Tumor Promoter and Suppressor. Cancer Res 65(17):7782-7789.

2. Girish, K., et al (2009). Hyaluronidase Inhibitors: A Biological and Therapeutic Perspective. Curr. Med. Chem. 16(18):2261-2288.

3. Whatcott, C., et al (2011). Targeting the Tumor Microenvironment in Cancer: Why Hyaluronidase Deserves a Second Look. Cancer Discovery. 1(4):291-96.

4. Whatcott, C., et al (2016). Hyaluronidase To Enhance NanoparticleBased Photodynamic Tumor Therapy. Nano Lett. 16(4):2512-2521.

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。