酒精饮料是日常消费的饮品之一。研究表明,大量饮酒可能导致各种肝脏疾病并增加死亡率。酒精(乙醇,C?H?OH)的定量测定在基础研究、药物发现、临床研究和酿酒领域有广泛应用。
简单、直接且易于自动化的乙醇浓度测定方法非常受欢迎。BioAssay Systems的QuantiChrom?乙醇检测试剂盒基于改进的重铬酸盐法,其中重铬酸盐被乙醇还原为蓝色的铬(Cr??)产物。在580纳米处测量的颜色强度是样本中酒精浓度的直接指标。优化的配方显著减少了原始样本中物质的干扰,并表现出高灵敏度。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品乙醇测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
乙醇测定试剂盒 | BAS-DIET-500 | 查看 |
应用领域:
- 酒精含量样本(如葡萄酒、啤酒)和酵母培养物中的乙醇测定。对于酒精含量低于0.1%的样本(如血清或血浆),推荐使用EnzyChrom?乙醇检测试剂盒(产品编号ECET-100)。
主要特点:
- 敏感且准确。在96孔板测定中,乙醇的检测范围为0.04% - 2%。
- 方便且高通量。操作过程包括加入单一工作试剂、孵育8分钟、加入终止试剂并读取吸光度。可轻松自动化为高通量96孔板测定方法,每天可处理数千个样本。
- 用途广泛。可在96孔板或比色皿中进行测定。
试剂盒组成(96孔板测定,500次测试):
- 试剂A:50毫升
- 试剂B:50毫升
- 10%三氯乙酸:50毫升
- 标准液:2毫升(10%体积比乙醇)
储存条件:
试剂盒在室温下运输。将试剂储存于室温,乙醇标准液储存于4°C。保质期:收货后12个月。
注意事项:
试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
操作程序
96孔板操作流程:
1. 通过混合120微升10%标准液和480微升蒸馏水,配制600微升2%预混液。将标准液稀释后,将100微升标准液和样本分别加入透明底96孔板的孔中。
2. 使用多通道移液器迅速加入100微升试剂A。轻轻敲击孔板以混合。
3. 在室温下孵育8到30分钟。试剂颜色在1-4孔中从黄色变为明显的蓝色。使用多通道移液器迅速加入100微升终止试剂B。敲击孔板以混合。
4. 在570-600纳米处读取吸光度(峰值在580纳米)。
比色皿操作流程:
1. 配制2%、1%、0.5%的标准液,并使用蒸馏水作为空白对照。将400微升稀释后的标准液和400微升样本分别转移到1.5毫升离心管中。
2. 迅速向每个离心管中加入400微升试剂A,并短暂涡旋混合。
3. 在室温下孵育8到30分钟。迅速加入400微升试剂B,并短暂混合。
4. 转移至比色皿,并在570-600纳米处读取吸光度(峰值在580纳米)。
注意:对于比色皿测定,建议在加入试剂时设置间隔,例如先向离心管1中加入试剂A,1分钟后向离心管2中加入等。在完成孵育步骤后,先向离心管1中加入终止试剂B,1分钟后向离心管2中加入等。这将确保各离心管之间的孵育时间一致。
计算:
从标准液的吸光度值中减去空白吸光度(水,#8),并绘制吸光度与标准酒精浓度的关系图。通过标准曲线确定样本中的乙醇浓度。
换算:1%(体积比)乙醇等于170 mM或785 mg/dL。
所需材料(未提供):移液(多通道)设备。
96孔板操作流程:透明底96孔板(如Corning Costar)和孔板读取器。
比色皿操作流程:离心管、台式离心机、比色皿和分光光度计。
一般注意事项:
1. 如果样本中含有葡萄糖或甘油,使用BioAssay Systems的专用乙醇检测试剂盒(ECET-100)。对于仅含糖类(如葡萄糖)的样本,使用糖类去除试剂盒(DSRK-500)在使用DIET-500试剂盒检测之前去除干扰物。
2. 本测定基于动力学反应。加入试剂A和B(终止试剂)的速度应快,混合应简短但充分。
3. 样本预处理:
- 含蛋白质的样本(如血浆、血清、培养基):通过向1体积样本中加入2体积10%三氯乙酸(已提供)进行脱蛋白处理。在台式离心机上以14,000转/分钟离心5分钟,小心转移上清液进行检测(n = 3)。
- 唾液和尿液可以直接分析(n = 1)。
- 对于葡萄酒,检测前将样本稀释至约1% - 2%。
示例:
96孔板测定中的标准曲线
文献:
1. Laksitorini, M. D., et al. (2020). Impact of Wnt/beta-catenin signaling on ethanol-induced changes in brain endothelial cell permeability. Journal of Neurochemistry.
2. Duy, D. L., Suda, Y., & Irie, K. (2017). Cytoplasmic deadenylase Ccr4 is required for translational repression of LRG1 mRNA in the stationary phase. PloS one, 12(2).
3. Nugent, B., Ali, S. S., Mullins, E., & Doohan, F. M. (2019). A Major Facilitator Superfamily Peptide Transporter From Fusarium oxysporum Influences Bioethanol Production From Lignocellulosic Material. Frontiers in microbiology 10:295.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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