BioAssay Systems 谷氨酸脱氢酶测定试剂盒，用于测定生物样本中的GLDH活性

谷氨酸脱氢酶（GLDH）是一种能够催化谷氨酸和α-酮戊二酸相互转化的酶。血液中GLDH水平升高表明肝脏受损，因此GLDH在肝病的诊断中发挥重要作用，尤其是与转氨酶联合使用时。表达微生物GLDH的转基因植物在耐除草剂、耐干旱和抗病原体感染方面表现出更好的耐受性。BioAssay Systems的非放射性比色法GLDH检测基于NADH偶联的酶促反应，将四氮唑盐MTT还原为在565 nm处具有最大吸收峰的还原型MTT。565 nm处吸光度的增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品谷氨酸脱氢酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 快速灵敏。线性检测范围（20 uL样本）：30分钟反应为0.4至80 U/L，120分钟反应的检测下限为0.1 U/L。

- 方便高效。均质“混合-孵育-测量”型检测。可在高通量筛选液体处理系统上自动化操作，每天可处理数千个样本。

应用

用于测定生物样本（如血浆、血清、尿液、组织和培养基）中的GLDH活性。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）

- 检测缓冲液：10 mL

- 二氢硫色素：120 uL

- NAD溶液：1 mL

- 校准液：1.5 mL

- MTT溶液：1.5 mL

- 底物：1.5 mL（1 M谷氨酸）

储存条件

试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分储存于-20°C。有效期：收到后6个月。

注意事项

- 试剂仅供研究使用。使用试剂时需遵循实验室试剂的常规注意事项。详细信息请参阅材料安全数据表。

操作步骤

本检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，加入工作试剂时需迅速，混合需短暂但充分。建议使用多通道移液器。检测可在任何所需温度下进行（例如25°C或37°C）。

样本准备

- 血清和血浆可直接检测。

- 组织：解剖前，用磷酸盐缓冲液（pH 7.4）冲洗组织以去除血液。将50 mg组织在含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）的缓冲液中匀浆。在4°C下以10,000 x g离心15分钟。取上清液用于检测。

- 细胞裂解液：通过在4°C下以2,000 x g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞，不要使用蛋白酶酶收获细胞，而是使用橡胶刮刀。在含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）的冷缓冲液中适当体积中匀浆或超声处理细胞。在4°C下以10,000 x g离心15分钟。取上清液用于检测。

- 所有样本可在-20°C至-80°C下保存至少一个月。

试剂准备

将试剂平衡至所需反应温度（例如25°C或37°C）。使用前短暂离心试管。工作试剂（WR）的配制：对于每次96孔检测，将10 uL底物、14 uL MTT溶液、9 uL NAD溶液、1 uL二氢硫色素和50 uL检测缓冲液混合。空白工作试剂（BWR）的配制：对于每次96孔检测，将14 uL MTT溶液、9 uL NAD溶液、1 uL二氢硫色素和60 uL检测缓冲液混合（即不加底物）。建议现配现用工作试剂。

反应准备

1. 将100 uL H?O（ODH?O）和100 uL校准液（ODCAL）溶液分别加入透明平底96孔板的孔中。

2. 将20 uL样本分别加入两个孔中。向一个样本孔中加入80 uL WR，向另一个样本孔中加入80 uL BWR。轻轻敲击孔板以混合。

3. 在酶标仪上读取565 nm处的吸光度（OD?），30分钟后再次读取（OD??）。

所需材料（但未提供）

移液装置及配件（如多通道移液器）、透明平底96孔板（如Corning Costar）、离心管和酶标仪。

文献：

1. Chou, KH and WE Splittstoesser, WE (1972) Glutamate dehydrogenase from pumpkin cotyledons characterization and

isoenzymes. Plant Physiol. 49: 550-4.

2. Yamaya, T et. al. (1984). Characteristics of glutamate dehydrogenase in mitochondria prepared from corn shoots. Plant Physiol. 76: 1009-13.

3. Cho, SW et. al. (1995). Two soluble forms of glutamate dehydrogenase isoproteins from bovine brain. Eru. J. Biochem. 233:340-6.

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。