生物素(维生素B7)是一种水溶性维生素,参与代谢、细胞生长和蛋白质合成。它是多种羧化酶的辅因子,这些酶对于脂肪酸、葡萄糖和氨基酸的代谢至关重要。生物素广泛存在于各种食物中,通常也被用作膳食补充剂。在生物技术领域,生物素常通过一种称为生物素化的过程与蛋白质结合。这些生物素化的蛋白质可以通过链霉亲和素(streptavidin)和/或亲和素(avidin)对生物素的强亲和力在生化分析(如ELISA)中被特异性选择。
BioAssay Systems的生物素检测试剂盒基于亲和素对4'-羟基偶氮苯-2-羧酸(HABA)的弱亲和力以及对生物素的强亲和力。亲和素-HABA复合物试剂在500 nm处有吸收峰。当这种有色的亲和素-HABA试剂与生物素接触时,生物素会与亲和素结合,置换出HABA,导致吸收峰降低。在500 nm处吸收峰的降低与样本中的生物素含量成正比。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品生物素测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
生物素测定试剂盒 | BAS-DBIO-100 | 查看 |
主要特点
- 快速且灵敏。线性检测范围:30 ?L样本(96孔板)时生物素浓度为8 - 200 ?M,或10 ?L样本(384孔板)时生物素浓度为10 - 200 ?M。
- 便捷。操作过程仅需加入一种工作试剂,并立即读取吸光度。
- 高通量。“加样-混合-读取”型检测法。可轻松自动化为高通量96孔或384孔板检测法,每天可检测数千个样本。
应用
- 直接检测:食品、化妆品、补充剂以及生物素化蛋白或抗体中的生物素。
试剂盒内容(96孔板检测100次)
- 试剂A:35 mL
- 标准品:120 ?L(10 mM生物素)
- 试剂B:1.8 mL
储存条件
试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分储存于-20°C。保质期:收货后12个月。
注意事项
试剂仅供研究使用。打开标准品管之前请短时间离心。检测前将所有组分平衡至室温。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规安全措施。请参考材料安全数据表以获取详细信息。
样本:样本应澄清、无沉淀,且蛋白质浓度<10 mg/mL。对于有沉淀的样本,以14,000 rpm离心5分钟,并使用上清液进行检测。对于蛋白质浓度>10 mg/mL的样本,用水稀释。
384孔板操作步骤(可进行320次检测)
1. 标准品制备:按照96孔板操作步骤第1部分的描述制备标准品。
2. 加样:将10 ?L标准品分别加入透明、平底384孔板的不同孔中。将每个样本的10 ?L分别加入不同的孔中。
3. 工作试剂制备:按每孔计算,将100 ?L试剂A和5 ?L试剂B混合,制备足够量的工作试剂。
4. 反应:向标准品孔和样本孔中各加入100 ?L工作试剂。轻拍平板,使混合物简短且充分混合。在室温下孵育20分钟。
5. 读数:在500 nm(470 - 520 nm)处读取光密度。
所需材料(但未提供)
移液装置、离心管、透明平底96孔或384孔板(例如VWR货号82050-760或VWR货号82051-298)以及微孔板读数仪。
结果示例
dH2O中的生物素标准曲线(96孔板)
文学:
1. Yang, W., et al (2009). Targeting cancer cells with biotin–dendrimer conjugates. Eur. J. Med. Chem. 44(2): 862-868.
2. Tong, L. (2013). Structure and function of biotin-dependent carboxylases. Cell. Mol. Life Sci. 70(5): 863-891.
3. Lesch, H.P., et al (2010). Avidin-biotin technology in targeted therapy.Expert Opin. Drug Deliv. 7(5): 551-564.
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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