BioAssay Systems 醇脱氢酶测定试剂盒--便捷且高通量

乙醇脱氢酶（ADH）是一种氧化还原酶，能够催化醇类与醛类或酮类之间的相互转化。 在人类和其他生物体中，ADH对于分解可能具有毒性的醇类物质非常重要。在酵母菌和某些细菌中，ADH催化相反的反应，并在发酵过程中产生酒精。BioAssay Systems的非放射性、比色法ADH检测基于NADH偶联的酶促反应，将四氮唑盐MTT还原为一种在565 nm处具有最大吸收峰的还原型MTT。在565 nm处的吸光度增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品醇脱氢酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 快速且灵敏。线性检测范围（20 ?L样本）：30分钟反应时间为0.4至80 U/L，120分钟反应时间的检测限为0.1 U/L。

- 便捷且高通量。均质“混合-孵育-测量”型检测。可轻松在高通量筛选液体处理系统上自动化操作，每天可处理数千个样本。

应用

- 生物样本（如血浆、血清、尿液、组织和培养基）中乙醇脱氢酶活性的测定。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）

- 检测缓冲液：10 mL

- 二氢硫辛酸：120 ?L

- NAD溶液：1 mL

- 校准液：1.5 mL

- MTT溶液：1.5 mL

- 底物：1 mL（10%乙醇）

储存条件

- 试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分存于-20°C。

- 保质期：收到后6个月。

注意事项

- 试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

操作程序

- 本检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，向样本中加入工作试剂应迅速，混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。检测可在任何所需温度（例如25°C或37°C）下进行。

样本准备

- 血清和血浆可直接检测。

- 组织：解剖前，用磷酸盐缓冲液（pH 7.4）冲洗组织以去除血液。将组织（50 mg）在约200 ?L含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）的缓冲液中匀浆。在4°C下以10,000 x g离心15分钟。取上清液进行检测。

- 细胞裂解液：通过在4°C下以2,000 x g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞，不要使用蛋白酶收获细胞，而是使用橡胶刮刀。在适当体积的冷缓冲液中匀浆或超声细胞，缓冲液中含有50 mM磷酸钾（pH 7.5）。在4°C下以10,000 x g离心15分钟。取上清液进行检测。

- 所有样本可在-20至-80°C下至少保存一个月。

试剂准备

- 将试剂平衡至所需反应温度（例如25°C或37°C）。使用前短暂离心试管。

- 工作试剂（WR）的配制：对于每次96孔检测，将5 ?L底物、14 ?L MTT溶液、9 ?L NAD溶液、1 ?L二氢硫辛酸和55 ?L检测缓冲液混合。

- 空白工作试剂（BWR）的配制：对于每次96孔检测，将14 ?L MTT溶液、9 ?L NAD溶液、1 ?L二氢硫辛酸和60 ?L检测缓冲液混合（即不加底物）。建议每次检测前新鲜配制工作试剂。

所需材料（但未提供）

- 移液装置及配件（例如多通道移液器）、透明平底96孔板（例如Corning Costar）、离心管和酶标仪。

示例：

在室温下，使用200 uM腺苷检测了牛小肠来源的不同量的腺苷脱氨酶（ADA），检测时间为30分钟。

文献参考：

1. Kato, S et. al. (1984). Improved assay for alcohol dehydrogenase activity in serum by centrifugal analysis. Clin. Chem. 30:1817-20.

2. Yoshida, A et. al. (1981). Enzymatic and Structural Differences between Usual and Atypical Human Liver Alcohol Dehydrogenases. J. Biol.Chem. 256: 12430-6.

3. Theorell, H et. al. (1969). On the effects of some heterocyclic compounds on the enzymic activity of liver alcohol dehydrogenase.Acta Chem. Scand. 23: 255-60.

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。