BioAssay Systems 山梨醇脱氢酶测定试剂盒，用于生物样本中SDH活性的测定

山梨醇脱氢酶（SDH）是一种能够催化山梨醇和果糖相互转化的酶。血液中SDH水平升高表明肝脏受损，因此SDH在肝脏疾病的诊断中发挥着重要作用，尤其是与转氨酶联合使用时。此外，SDH水平还可用于评估糖尿病并发症，例如增殖性糖尿病视网膜病变。

BioAssay Systems的非放射性、比色法SDH检测试剂盒基于NADH偶联的酶促反应，将四氮唑盐MTT还原为其还原形式，该形式在565 nm处有最大吸收峰。565 nm处吸光度的增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品山梨醇脱氢酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

山梨醇脱氢酶测定试剂盒主要特点：

- 快速且灵敏。线性检测范围（20 ?L样本）：12分钟反应时间为0.1至125 U/L。

- 方便且高通量。均质的“混合-孵育-测量”类型检测方法。可在高通量筛选液体处理系统上自动化操作，每天可处理数千个样本。

- 应用范围：用于生物样本（例如血浆、血清、尿液、组织和培养基）中SDH活性的测定。

操作步骤：

本检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，向样本中加入工作试剂时应迅速，混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。检测可在任何所需温度下进行（例如25°C或37°C）。

样本准备：

- 血清和血浆可直接检测。

- 组织：解剖前，用磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.4）冲洗组织以去除血液。将50 mg组织在200 ?L冷PBS缓冲液中匀浆。在4°C下以14,000 x g离心5分钟，取上清液用于检测。

- 细胞裂解液：通过在4°C下以2,000 x g离心5分钟收集细胞。对于贴壁细胞，不要使用蛋白酶酶收获细胞，而是使用橡胶刮刀。在适量的冷PBS缓冲液中匀浆或超声处理细胞。在4°C下以14,000 x g离心5分钟，取上清液用于检测。

- 所有样本可在-20至-80°C下保存至少一个月。

试剂准备：将试剂平衡至所需反应温度（建议37°C）。使用前短暂离心试管。

检测步骤：

1. 将100 ?L去离子水（ODH?O）和100 ?L校准液（ODCAL）分别加入透明平底96孔板的孔中。

2. 向一个孔中加入20 ?L去离子水，作为空白对照。将每个样本的20 ?L分别加入其他孔中。

3. 通过混合以下试剂为所有反应孔准备足够量的工作试剂（WR）：对于每个96孔检测，混合2 ?L底物、8 ?L NAD/MTT溶液、1 ?L二氮杂菲和75 ?L检测缓冲液。向所有样本和空白孔中加入80 ?L WR，轻拍平板以混合均匀。

4. 在所需温度下孵育；在3分钟（OD?）和15分钟（OD??）时，使用平板阅读器读取565 nm处的吸光度。

所需材料（但未提供）：

- 移液装置及配件（例如多通道移液器）、透明平底96孔板（例如Corning Costar）、离心管和平板阅读器。

文献参考：

1. Uzozie, A et al (2014). Sorbitol Dehydrogenase overexpression and other aspects of dysregulated protein expression in human precancerous colorectal neoplasms: a quantitative proteomics study.Mol Cell Proteomics. 13(5):1198-1218.

2. Linstad, RI at al (2013). Inhibition of Sorbitol Dehydrogenase by nucleosides and nucleotides. Biochem Biophys Res Commun. 435(2):202-208.

3. Aguayo, MF et al (2013). Sorbitol dehyodrogenase is a cytosolic protein required for sorbitol metabolism in Arabidopsis thalania. Plant Sci. 205-206: 63-75. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。