铜是一种必需的微量元素。含铜酶在铁和儿茶酚胺代谢、自由基清除以及血红蛋白、弹性蛋白和胶原蛋白的合成中发挥重要作用。铜主要以血浆铜蓝蛋白的形式存在于肝脏中。铜水平低下与智力迟钝、脱色、贫血、肌张力低下以及骨骼坏血病样改变有关。铜水平是诊断威尔逊病、小细胞低色素性贫血以及因胶原合成减少导致的骨骼疾病等疾病的关键指标。简单、直接且易于自动化的铜浓度测定方法在研究、药物发现和环境监测中具有广泛的应用。BioAssay Systems的铜测定试剂盒专为无或最少样本处理的铜测定而设计。改进的方法利用了一种色原,该色原与铜离子特异性结合形成有色络合物。在359纳米处测量的颜色强度与样本中的铜浓度成正比。优化的配方显著减少了原始样本中物质的干扰。
作为BioAssay Systems在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems热销产品铜测定试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
铜测定试剂盒 | BAS-DICU-250 | 查看 |
主要特点:
- 敏感且准确。在96孔板测定中,铜的线性检测范围为7微克/分升(1.0微摩尔)至300微克/分升(47微摩尔)。
- 简单且高通量。简单的操作流程可轻松自动化为96孔板的高通量测定方法,每天可处理数千个样本。
- 试剂稳定性高且用途广泛。优化的配方显著提高了试剂和信号的稳定性。可采用比色皿或96孔板测定。
应用领域:
- 直接测定:生物、环境、食品和饮料样本中的铜。
- 药物发现/药理学:药物对铜代谢的影响。
试剂盒组成(96孔板测定,250次测试):
- 试剂A:10毫升
- 试剂B:1.5毫升
- 试剂C:40毫升
- 铜标准液:1毫升(1.5毫克/分升Cu??)
储存条件:
试剂盒在室温下运输。将所有试剂储存于4°C。保质期:收货后12个月。
注意事项:
试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规注意事项。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。
操作程序:
注意:金属螯合剂(如EDTA)会干扰本测定,应在样本准备中避免使用。
96孔板操作流程:
1. 标准品和样本准备:
- 标准品:将100微升蒸馏水(dH?O)转移到标记为“空白”的离心管中。在另一支标记为“标准品”的离心管中,混合20微升1.5毫克/分升的标准液和80微升蒸馏水(最终浓度为300微克/分升Cu??)。
- 样本:将100微升样本分别转移到不同的离心管中。
- 向每个离心管中加入35微升试剂A(三氯乙酸),涡旋混合。如果样本中含有蛋白质(如血清/血浆),则会形成沉淀。将离心管以14,000转/分钟的速度离心2分钟,并使用上清液进行测定。对于不含蛋白质的样本,混合液保持澄清,无需离心。
- 将100微升空白、标准品和样本分别加入透明平底96孔板的不同孔中。
2. 工作试剂准备:
- 对于每个测定孔,通过混合5微升试剂B和150微升试剂C来准备工作试剂。将150微升工作试剂转移到每个孔中,并轻拍孔板以充分混合。
3. 孵育与读数:
- 在室温下孵育5分钟,并在356-362纳米处读取吸光度(峰值吸收在359纳米)。
- 注意:如果样本的吸光度值高于300微克/分升标准品的吸光度值,则需用蒸馏水稀释样本并重新测定。将结果乘以稀释因子。
比色皿操作流程:
- 按照96孔板测定流程准备标准品和样本。
- 将400微升标准品和样本分别转移到不同的比色皿中。
- 加入600微升工作试剂,用移液器混合。
- 在室温下孵育5分钟,并在356-362纳米处读取吸光度(峰值吸收在359纳米)。
示例:
采用96孔板测定流程对人血清、大鼠血浆、大鼠血清和牛血清进行双份测定。铜浓度分别为97 ± 1、104 ± 1、101 ± 2、78 ± 1微克/分升。
96孔板测定中的标准曲线
文献:
1. Hendricks, M. R., et al (2021). Extracellular vesicles promote transkingdom nutrient transfer during viral-bacterial co-infection.Cell Reports, 34(4), 108672.
2. Matte, J. J., & Audet, I. (2020). Maternal perinatal transfer of vitamins and trace elements to piglets. Animal: An International Journal of Animal Bioscience, 14(1), 31-38.
3. Braunschmid, V., et al. (2020). A fungal ascorbate oxidase with unexpected laccase activity. International Journal of Molecular Sciences, 21(16).
BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司,专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒,产品种类齐全,主要用于科学研究和生物医药开发,以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验,已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括:1.血液尿液化学;2.酶活性测定;3.能量代谢;4.氧化应激;5.高通量HTS试剂;6.阴阳离子检测。
作为BioAssay Systems在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。
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