NanoTag-ALFA选择器CE-专为在低温下生理缓冲液中高效纯化ALFA标签蛋白而设计

ALFA选择器CE（“可低温洗脱”）是一种创新的亲和树脂（琼脂糖&磁性），专为在低温（例如4°C）下生理缓冲液中高效纯化ALFA标签蛋白而设计。 每个单位包含10毫克ALFA洗脱肽。

ALFA选择器CE（“可低温洗脱”）是一种创新的亲和树脂，专为在低温下生理缓冲液中高效纯化ALFA标签蛋白而设计。

ALFA选择器CE基于一种中等亲和力（Kd ≈ 100 nM）的单域抗体（sdAb），这种抗体共价固定在4%交联的琼脂糖或磁性琼脂糖珠上。 ALFA选择器CE经过优化，可在4°C下使用生理缓冲液和ALFA洗脱肽进行高效、竞争性洗脱。为此，每个单位的ALFA选择器CE都附带10毫克ALFA洗脱肽，足以用于25毫升洗脱缓冲液。

或者，可以在酸性或变性条件下进行洗脱。 ALFA选择器CE可以通过酸性或碱性条件（100 mM甘氨酸pH 2.2、150 mM NaCl或100 mM NaOH）进行再生，即使经过10次再生循环也不会失去容量。创新的、定向的、选择性的通过柔性连接链连接，保证了sdAb的高度可及性，并大大消除了批次间的变化。

由于sdAb的单链性质及其共价连接，在洗脱过程中，即使在恶劣条件下（例如SDS样品缓冲液），也不会观察到IgG的轻链和重链的“泄漏”。

因此，ALFA选择器CE具有对ALFA融合蛋白的高特异性和卓越容量，同时显示出可忽略不计的非特异性背景。 ALFA选择器CE不仅与生理缓冲液兼容，还与高严格性缓冲液兼容。因此，ALFA选择器CE为根据实验需求调整结合和洗涤条件提供了极大的自由度。

艾美捷ALFA选择器CE（包括ALFA肽N1520-10mg）：

货号：N1512

克隆号： C1

宿主： 骆驼

生产方式： 大肠杆菌

应用： 免疫沉淀（IP）

容量： > 3 ug ALFA标签GFP每uL装填珠子

靶标： ALFA标签

特异性： 识别ALFA标签（SRLEEELRRRLTE）

配方：50%的PBS悬浮液，含有20%乙醇。另外，提供10毫克冻干的ALFA洗脱肽。

运输条件： 常温

保存条件：在4°C下保存，最长可达12个月。不要冷冻！

注意事项： 仅限体外使用/仅用于研究。无毒、无害、无传染性。

实验示例：

使用ALFA选择器CE从HeLa细胞裂解液中捕获五标签对照蛋白DYKDDDDK-HA-MBP-Myc-ALFA（编号P0102）的示例。 使用含有一定量五标签对照蛋白的HeLa细胞裂解液作为输入材料。与ALFA选择器CE结合的蛋白使用ALFA洗脱肽（编号N1520）进行洗脱。指示的蛋白部分通过SDS-PAGE分析，随后进行考马斯蓝染色。

文献参考：

G?tzke H, Kilisch M, Martínez-Carranza M, Sograte-Idrissi S, Rajavel A, Schlichthaerle T, Engels N, Jungmann R, Stenmark P, Opazo F, Frey S. The ALFA-tag is a highly versatile tool for nanobody-based bioscience applications. Nat Commun. 2019 Sep 27;10(1):4403. doi: 10.1038/s41467-019-12301-7. PMID: 31562305; PMCID: PMC6764986.

Kilisch M, G?tzke H, Gere-Becker M, Crauel A, Opazo F, Frey S. Discovery and Characterization of an ALFA-Tag-Specific Affinity Resin Optimized for Protein Purification at Low Temperatures in Physiological Buffer. Biomolecules. 2021;11(2):269. Published 2021 Feb 12. doi:10.3390/biom11020269

Weyer Y, Schwabl SI, Tang X, et al. The Dsc ubiquitin ligase complex identifies transmembrane degrons to degrade orphaned proteins at the Golgi. Nat Commun. 2024;15(1):9257. Published 2024 Oct 26. doi:10.1038/s41467-024-53676-6 (IP; yeast)