靶向精准，尺寸极致：Nanotag sdAb 单域抗体在基础科研中的新契机

你的SCI高分文章，下一次“偶然”的发现，也许就从一支 15 kDa 的 sdAb 开始。

随着结构生物学、细胞成像与蛋白组学的高速发展，研究者对“小而精”的亲和工具提出了前所未有的苛刻需求：既要保持单克隆抗体的高特异性和高亲和力，又必须突破传统 IgG 的体积限制，以便深入组织切片、活细胞甚至亚细胞器内部进行标记、捕获或调控。源自骆驼科动物重链抗体（HCAb）的可变区——单域抗体（single-domain antibody, sdAb，又称 VHH 或 nanobody）——因其 12–15 kDa 的极小尺寸、高稳定性、可原核表达及可工程化改造等优势，已成为学术界公认的“下一代亲和探针”。Nanotag 品牌专注于 sdAb 研发，为科研工作者提供了品类齐全、序列公开、批次稳定的工具库，使“用抗体做实验”不再受限于体积、结构与宿主兼容性。

单域抗体（sdAb）的技术渊源与结构学优势

1.生物起源

sdAb 最早在 1993 年由比利时布鲁塞尔自由大学 Hamers-Casterman 团队在骆驼血清中发现。与普通 IgG 不同，骆驼科动物体内天然存在一种仅由重链组成的抗体（HCAb），其抗原结合功能完全由单一可变区（VHH）承担。

2.结构特征

分子量仅 ~12–15 kDa，仅为传统 Fab 片段的 1/3，IgG 的 1/10。

长且突出的 CDR3 区可深入靶蛋白的狭缝或活性口袋，识别常规抗体难以触及的表位。

框架区（FR2）的亲水性突变使其在缺少轻链的情况下仍保持高溶解度。

3.生化与生物物理表现

高耐热（Tm 常 > 70 °C）、耐酸碱、耐有机溶剂，适用于极端实验条件。

可在原核（E. coli）、酵母、昆虫及哺乳动物细胞等多种体系中表达，成本显著低于传统抗体。

单基因编码，易于通过基因工程融合荧光蛋白、酶、标签或多聚化结构域。

Nanotag sdAb 的产品特点：为科研设计，为发现服务

Nanotag 并未将 sdAb 视为“缩小版抗体”，而是围绕科研流程中的真实痛点进行系统优化：

覆盖度：提供针对 GFP、mCherry、HA、Myc、V5、FLAG、Actin、Tubulin、RFP、Vimentin 等 50 余种高引用标签与内源靶点的 sdAb。

模块化设计：所有序列均公开，使用者可直接在质粒骨架中进行 PCR 拼接，一步构建融合表达载体。

多价/多场景方案：同一抗原提供单体、Fc 融合、HRP 偶联、荧光染料偶联、磁珠/琼脂糖固化等多种版本，避免“一抗二抗”冗长流程。

sdAb 在基础科研中的四大典型应用

1.超高分辨成像（Super-resolution & Live-cell imaging）

传统 IgG 的 ~150 kDa 体积会在靶蛋白周围产生 10–20 nm 的“定位误差”，对 STED、MINFLUX 或 DNA-PAINT 等纳米级成像技术而言已是不可忽略的系统误差。Nanotag sdAb 将标记尺寸压缩到 < 3 nm，可实现对核孔复合体、中心体微管、突触间隙蛋白的精确定位。

案例思路：将 GFP-sdAb 融合自标记 HaloTag 或 SNAP-tag，实现双色、三通道超分辨追踪。

2.体内原位 pull-down（In-cell co-IP）

sdAb 可在活细胞中瞬时表达为“内源抗体”，通过表位标签捕获复合物。由于分子量小，其对蛋白相互作用网络的扰动远低于传统抗体。

实验策略：在 HEK293 细胞中共表达 HA-靶蛋白与 HA-sdAb-Fc，利用 Protein A/G 磁珠完成一步富集，洗脱后可直接进行质谱鉴定。

3.结构生物学辅助模块（Cryo-EM & NMR）

sdAb 可作为“结晶伴侣”或“冷冻电镜支架”稳定靶蛋白构象，提高分辨率。

典型案例：GPCR 研究中，Nanotag 针对构象表位开发的 sdAb 成功锁定受体活性态，使冷冻电镜密度图分辨率提升至 2.7 ?。

4.基因编辑与功能调控（Chromobody & intrabody）

将 sdAb 与转录激活域（VPR）、抑制域（KRAB）或表观修饰酶融合，可在不引入外源蛋白切割的情况下实现对内源蛋白的可逆调控。

应用示例：Nanotag 的 H3K9me3-sdAb-KRAB 系统在 iPSC 中实现位点特异性基因沉默，脱靶效应低于 CRISPRi。

与传统抗体、scFv、DARPin 的比较

从“能用”到“敢用”——sdAb 为科研想象力松绑

传统抗体技术曾推动生命科学研究跨越多个时代，但其固有的体积、结构与宿主限制也在无形中划定了实验设计的边界。Nanotag sdAb 以“极致小、极致稳、极致可塑”三大特征，为科学家提供了重新定义实验范式的机会：

在超分辨成像中，我们首次看到单个钙通道在膜上的“排队”轨迹；

在冷冻电镜中，我们解析出瞬时开放的转运蛋白构象；

在活细胞中，我们以毫秒级精度控制信号通路的开关。

这些突破并非源于昂贵仪器，而是源自一个 12 kDa 的“微型抗体”。当工具不再成为限制，研究者得以把注意力完全聚焦于科学问题本身。Nanotag sdAb 正在把“不可能”变成实验台上触手可及的操作。

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